Anti-ASP/AKAP associated Sperm Protein抗體,精子相關(guān)蛋白AKAP抗體,產(chǎn)品經(jīng)無數(shù)次市場驗證,若出現(xiàn)質(zhì)量問題可無條件換貨或退貨,現(xiàn)貨直銷,免費送貨上門。
【產(chǎn)品規(guī)格】:0.1ml/0.2ml
【抗體來源】:Rabbit OR Mouse
【產(chǎn)品用途】:用于免疫組化實驗,WB實驗,相應(yīng)的標(biāo)記抗體有HRP標(biāo)記抗體,FITC標(biāo)記,BIO等。
【貨 期】: 現(xiàn)貨
【性 狀】: Lyophilized or Liquid
【濃 度】: 1mg/1ml
【亞 型】: IgG
【貯 存】: 貯存于-20℃.
【相關(guān)標(biāo)記】:HRP Biotin Gold RBITC AP FITC Cy3 Cy5 Cy5.5 Cy7 PE PE-Cy3 PE-CY5 PE-CY5.5 PE-CY7 APC Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 647
Anti-ASP/AKAP associated Sperm Protein抗體,精子相關(guān)蛋白AKAP抗體溶解方法:方法1:我們的抗體(凍干粉)已經(jīng)包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐劑(疊氮鈉或*),您只需要加入滅菌的雙蒸水就行了??贵w溶解后,置于-20℃保存,分裝后使用,避免反復(fù)凍融,可保證至少1年有效;
方法2:也可以只加入一半體積的雙蒸水,再用一半體積的甘油補足,置于-20℃保存,這樣抗體不會凍,有利于抗體的穩(wěn)定。后續(xù)試驗時,再使用對應(yīng)的緩沖液稀釋成工作液,即用即配。我們的抗體(凍干粉),在常溫放置下,至少一個月有效;若在-20℃下保存(*),至少三年有效。
抗體修復(fù)方式:
方法1:沸水浴修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境,保持外部沸騰狀態(tài)15min,自然冷卻至室溫;
方法2:微波修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中,高火5min,?;?min,中火5min,自然冷卻至室溫。
酶標(biāo)抗體效價測定程序:各種HRP酶標(biāo)記成抗體的效價測定程序如下(如:羊抗鼠IgG-HRP的效價測定):
1、抗原包板:15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔;
2、37°C包被60min或4°C過;
3、PBST洗板3次,5min/次;
4、加入倍比稀釋的HRP標(biāo)記抗體 0.1ml/孔;
5、37°C 30min;
6、PBST洗板5min/次×3;
7、底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min;
8、終止液:2N H2SO4 0.05ml/孔;
9、450nm 測定OD值;
10、陽性O(shè)D值比對照值大3倍,為判斷效價稀釋度。
P抗體特殊肽您需要的有關(guān)信息可與博奧森公司的技術(shù)人員。當(dāng)然首先建議您用少量肽來試驗的溶解方法,當(dāng)多肽*溶解后,才能加緩沖液(注意:應(yīng)將多肽加入到適當(dāng)溶劑中攪拌)。
一、凍干多肽的溶解
1、多肽溶解的主要問題是二級結(jié)構(gòu)的形成。雖然疏水肽鏈二級結(jié)構(gòu)的形成更明顯,但除zui短的肽鏈外,此現(xiàn)象產(chǎn)生在幾乎所有肽鏈,與極性無關(guān)。所以,溶解多肽的*個原則是使用無菌蒸餾水或去離子水,當(dāng)然無氧水。多肽溶液可能遇到細菌降解,為防止此情況的發(fā)生,應(yīng)溶解在無菌的蒸餾水中或用0.45或0.2孔徑的濾膜過濾除菌。含有Cys、Met、Trp的多肽很容易氧化,應(yīng)溶于無氧的水中,無氧水可通過注入惰性氣體(氮、氦、氬)減壓除氣得到;
2、若多肽不溶于純水,超聲處理有助于打碎顆粒并增加溶解度。注意:超聲處理會引起溶液發(fā)熱或多肽降解;
3、若多肽含有多個堿性氨基酸,使用(1-10%)的乙酸水溶液:對于疏水性強的多肽,應(yīng)使用50%的乙酸;
4、若多肽中含有大量酸性氨基酸,可用氨溶液(1-10%)或乙酸乙基*或重碳酸鹽等揮發(fā)性的堿性緩沖液溶解。pH值在層析前必須調(diào)整;
5、異丙醇和乙腈能溶解中等大小的多肽。若肽要上柱,有機溶劑的量必須很少否則將嚴(yán)重影響停留時間;
6、若多肽因含有Val、Leu、Met、Phe、Tyr、Ala等芳香鏈而高度疏水、或為中性肽時,DMF或DMSO等膜變性劑的使用,有利于多肽的溶解:
a.高濃度模變性劑通過破壞多肽的二級結(jié)構(gòu)而助溶;
b.膜變性劑適于多肽分析液的制備,但可能會對其生物活性的研究工作造成干擾;
c.DMF是*變性劑(zui高濃度可達30%),滴加至多肽溶解;
d.反相層析法時,DMF將與洗脫液前鋒一起流出,根據(jù)入量的多少,峰值可能很高。大多數(shù)肽能在大量DMF流出后幾分鐘內(nèi)流出,若肽鏈很小,洗脫太早,多肽的量將很低。
二、凍干多肽的保存
標(biāo)有“凍干保存"說明的多肽應(yīng)該保存在冰凍條件下,以-20℃以下*,其活性可保持多年。當(dāng)使用干凍產(chǎn)品時,開蓋前其容器應(yīng)在裝有新鮮干燥箱內(nèi)升至室溫。-20℃的產(chǎn)品,此過程需要一小時或更長,隨保裝而定。否則,當(dāng)容器打開,水氣進入導(dǎo)致凝縮而降低穩(wěn)定性。一旦打開,應(yīng)迅速稱量完畢,立即封閉以免潮解,親水肽更應(yīng)注意。
三、溶解多肽的保存
多肽溶液比干粉的穩(wěn)定性差很多,為了獲得較好的效果,遵循以下原則:
1、分成小包裝避免反復(fù)凍融。使用多少解凍多少;
2、溶于pH5-7無菌的緩沖液中,-20℃儲存;
3、由于細菌能降解多肽,儲存前應(yīng)過濾細菌;
4、包含Cys、Met、Try、Glu、Asp的多肽易于氧化,因此應(yīng)保存在無氧化劑的環(huán)境中。
我公司免費提供抗血清親合層析純化服務(wù),得到目的蛋白的抗體IgG。
我公司還免費提供真空冷凍抽干服務(wù),得到凍干粉狀的抗體IgG產(chǎn)品,以便產(chǎn)品的使用及*保存。
P抗體相關(guān)蛋白的英文名稱的全稱,也可同時提供該蛋白的全序列或氨基酸(多肽片斷)序列,供參考(不要求) 制備時間:2.5-3個月左右
制備流程:簽訂制備合同——付首付款——制備抗體——付清全款——免費將抗體寄給客戶
抗體制備
抗體產(chǎn)量:1、20ml兔多克隆抗體血清原液(小鼠為5ml腹水)
2、經(jīng)親和層析純化抗體IgG 10mg
3、多肽抗原3mg(用于客戶自行檢測抗體使用)
抗體效價:1:8000以上(ELISA)
說 明 書:提供抗體制備報告及抗體使用說明書
抗原要求:若客戶提供通過基因工程表達的抗原,則要求:抗原純度85%以上,分子量大于10KDa,抗原量12-13mg
產(chǎn)品包裝:免費真空冷凍抽干,zui終為您提供易于保存的凍干粉產(chǎn)品
特殊說明:特殊抗體的制備,價格另議