弧菌顯色培養(yǎng)基，用于食品、海產(chǎn)品、病人糞便樣品和水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的快速檢測。副溶血性弧菌顯綠色且菌落比較大，霍亂弧菌顯紅色，其它弧菌顯紅色、藍色或無色且菌落比較??；其它細菌絕大部分被抑制。本培養(yǎng)基的特異性高，可以克服TCBS培養(yǎng)基引起的假陰性結(jié)果，是一種很理想的快速檢測培養(yǎng)基
弧菌顯色培養(yǎng)基成份 (g/L)
特殊營養(yǎng)物質(zhì) | 75.0 |
混合顯色劑 | 4.45 |
瓊脂 | 15.0 |
pH 8.6 ± 0.1 25 ℃ | |
此配方可以進行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得*的結(jié)果。
注意
此培養(yǎng)基僅供實驗室使用。
用法
稱取本品 18.9g 加入200ml蒸餾水，加熱煮沸溶解并不停攪拌，加熱2-5分鐘。冷卻至45-50℃時，傾入無菌平皿。
注意：制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥，可在 37 ℃的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時。
貯存
制備好的平板可保存 2-5 天，應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處， 保存溫度 2-8 ℃，注意避光保存。
失效
干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。
操作步驟
1、按國家標準、 SN 標準、 FDA 標準或其它方法制備樣品液；
2、取 1ml 樣品液加入 9mlSCPB 肉湯或堿性蛋白胨水中， 37 ℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時；
3、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液，劃線接種到副溶血性上，做 2 個平板；
4、36±1℃培養(yǎng)18-24h，副溶血性弧菌顯綠色，菌落比較大；霍亂弧菌顯紅色，其它弧菌顯紅色、藍色或無色且菌落比較小, 其它細菌絕大部被抑制；
5、對可疑菌落可劃線接種到營養(yǎng)瓊脂平板上， 36 ± 1 ℃培養(yǎng) 12-16 小時，挑取單菌落做副溶血性弧菌全套生化試驗。
質(zhì)量控制
1 、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻，具有良好的流動性，呈淡黃色。制備好的平板呈淡粉色至黃色固體培養(yǎng)基。
2 、微生物試驗
在 36 ± 1 ℃培養(yǎng) 18-24h 小時：
質(zhì)控菌株 | ATCC | 生長情況 | 菌落顏色 |
副溶血性弧菌 | 17802 | +++ | 綠色，菌落比較大 |
* | 25923 | - | - |
大腸桿菌 | 25922 | -/+ | 無色 |
溶藻弧菌 | 17749 | +++ | 紅色且菌落比較小 |
* | +++ | 紅色 |
方法的局限性
本培養(yǎng)基不能直接鑒定霍亂弧菌，副溶血性弧菌的特異性可達90%，準確性非常高，有時可能需做其它補充試驗。
典型特征
典型副溶血性弧菌顯綠色且菌落比較大，霍亂弧菌顯紅色，其它弧菌顯紅色、藍色或無色且菌落比較小。
