中文名稱:原癌基因K-ras抗體,K-ras抗體
研究領(lǐng)域:免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 結(jié)合蛋白
抗體來源:Rabbit
克隆類型:Polyclonal
交叉反應(yīng):Human, Mouse, Rat,
產(chǎn)品應(yīng)用:WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蠟切片需做抗原修復(fù))
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
分 子 量:128/80kDa
細(xì)胞定位:細(xì)胞核 細(xì)胞漿 分泌型蛋白
性 狀:Lyophilized or Liquid
濃 度:1mg/1ml
免 疫 原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human AEBP1
亞 型:IgG
純化方法:affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
生 產(chǎn) 商:上海雅吉生物科技有限公司
親和層析可用于:
1、純化生物大分子;
2、稀溶液的濃縮;
3、不穩(wěn)定蛋白質(zhì)的貯藏;
4、從純化的分子中除去殘余的污染物;
5、用免疫吸附劑吸附純化對(duì)此尚無互補(bǔ)配體的生物大分子;
6、分離核酸是親和層析應(yīng)用的一個(gè)重要方面。
親和層析具有專一親和力的生物分子對(duì)主要有原癌基因K-ras抗體,K-ras抗體、DNA與互補(bǔ)DNA或RNA、酶與它的底物或競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑、激素(或藥物)與它們的受體、維生素和它的特異結(jié)合蛋白、糖蛋白與它相應(yīng)的植物凝集素等??捎H和的一對(duì)分子中的一方以共價(jià)鍵形式與不溶性載體相連作為固定相吸附劑,當(dāng)含有混合組份的樣品通過此固定相時(shí),只有和固定相分子有特異親和力的物質(zhì),才能被固定相吸附結(jié)合,其它沒有親和力的無關(guān)組份就隨流動(dòng)相流出,然后改變流動(dòng)組成份,將結(jié)合的親和物洗脫下來。親和層析中所用的載體稱為基質(zhì),與基質(zhì)共價(jià)連接的化合物稱配基。
親和層析純化過程簡(jiǎn)單、迅速,且分離效率高。對(duì)分離含量極少又不穩(wěn)定的活性物質(zhì)尤為有效。但本法必須針對(duì)某一分離對(duì)象,制備專一的配基和尋求層析的穩(wěn)定條件. 使用親和層析的方法可以簡(jiǎn)便、快速、高效地將目標(biāo)蛋白從雜蛋白溶液中分離純化出來,親和層析技術(shù)已成為廣泛應(yīng)用的一種蛋白分離技術(shù).或可為客戶提供的抗體或抗血清制備親和層析柱。 使用親和層析的方法可以簡(jiǎn)便、快速、高效地將目標(biāo)蛋白從雜蛋白溶液中分離純化出來,親和層析技術(shù)已成為廣泛應(yīng)用的一種蛋白分離技術(shù)。
1、石蠟切片置于67℃烘箱中,烘片2小時(shí),脫蠟至水,用pH7.4的PBS沖洗三次,每次3分鐘(3×3’)。
2、取一定量pH=6.0檸檬酸鹽緩沖液,加入微波盒中,微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的組織切片置于耐高溫塑料切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔微波處理10分鐘,取出微波盒流水自然泠卻,從緩沖液中取出玻片,先用蒸餾水沖洗兩次,之后用PBS沖洗2×3’。(注:不是所有的抗體都需要微波修復(fù)的,視具體情況而定)
3、每張切片加1滴3%H2O2,室溫下孵育10分鐘,以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶的活性。PBS沖洗3×3’。
4、除去PBS液,每張切片加1滴相應(yīng)的*抗體(相應(yīng)稀釋倍數(shù)),室溫下孵育2小時(shí)。
5、PBS沖洗3×5’。除去PBS液,每張切片加1滴聚合物增強(qiáng)劑,室溫下孵育20分鐘。PBS沖洗3×3’。
6、除去PBS液,每張切片加1滴酶標(biāo)抗鼠/兔聚合物,室溫下孵育30分鐘。PBS沖洗3×5’。
7、除去PBS液,每張切片加1滴新鮮配制的DAB液(二氨基聯(lián)苯胺),顯微鏡下觀察5分鐘。
8、蘇木素復(fù)染,0.1%HCl分化,自來水沖洗,藍(lán)化,切片經(jīng)梯度酒精脫水干燥,二甲苯透明,中性樹膠封固,晾干后觀察。
— 辣根過氧化物酶標(biāo)記 熒光素標(biāo)記 *標(biāo)記 膠體金離子標(biāo)記
將辣根過氧化物酶(HRP),熒光素(FTIC、RBITC、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、APC、PE),*(Biotin)及膠體金離子(CO-AO)等四類能量高、顯示快的分子,以共價(jià)鍵和離子鍵的方式連接到抗體或抗原蛋白分子上,制備成高度靈敏和特異性的分子探針,廣泛用于醫(yī)學(xué)病理學(xué)、免疫組織化學(xué)、分子生物學(xué)、生物制藥與獸醫(yī)藥研究等領(lǐng)域的分析研究與技術(shù)測(cè)定。以上分子探針的制備技術(shù),*有我公司*專家、教授經(jīng)過幾十年的摸索研究而自身建立完善和成熟的免疫化學(xué)技術(shù),達(dá)到水準(zhǔn)。
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