美國Colitag微生物酶底物法培養(yǎng)基
概述
用100ML含有硫代硫酸鈉的無菌取樣瓶加入待測水樣,目標(biāo)細(xì)菌在36℃(±0.5℃)的Colitag微生物培養(yǎng)基中培養(yǎng),總大腸菌群細(xì)菌產(chǎn)生的特異性生物酶β一半乳糖苷酶能分解Colitag微生物培養(yǎng)基中的色源底物ONPG,使培養(yǎng)呈現(xiàn)黃色;同時(shí)水樣中大腸埃希氏菌產(chǎn)生特異性的β一葡萄糖醛酸酶分解Colitag微生物培養(yǎng)基中的熒光底物MUG,產(chǎn)生特征性熒光。相同原理,糞(耐熱)大腸菌群在44.5℃(±0.5℃)培養(yǎng)時(shí)會(huì)分解Colitag微生物培養(yǎng)基中的色源底物ONPG,使培養(yǎng)基呈現(xiàn)黃色。
定性檢測方法:
1、將水樣倒入100ML無菌取樣瓶中,加入Colitag微生物培養(yǎng)基溶解。放入微生物培養(yǎng)箱,設(shè)定溫度36℃(±0.5℃)培養(yǎng)24小時(shí);不得超過28小時(shí)。
2、查看結(jié)果
無色說明所測樣品為陰性
黃色說明所測樣品總大腸菌群陽性
黃色伴有熒光說明所測樣品大腸埃希氏菌群陽性(配合暗箱式紫外分析儀查看)
糞(耐熱)大腸群菌設(shè)定溫度44.5℃(±0.5℃)培養(yǎng)24小時(shí)后,觀察黃色為陽性
定量檢測方法:
1、將水樣倒入100ML無菌取樣瓶中,加入Colitag微生物培養(yǎng)基溶解。
2、倒入51孔定量檢測盤或97孔定量檢測盤中;
3、用酶底物法程控定量封口機(jī)對(duì)定量檢測盤進(jìn)行封膜,36℃(±0.5℃)培養(yǎng)24小時(shí);不得超過28小時(shí)。
4、定量檢測盤查看結(jié)果:
無色說明所測樣品為陰性
黃色說明所測樣品總大腸菌群陽性
黃色伴有熒光說明所測樣品大腸埃希氏菌群陽性(配合暗箱式紫外分析儀查看)
對(duì)照MPN表計(jì)數(shù)得出結(jié)果
糞(耐熱)大腸群菌需44.5℃(±0.5℃)培養(yǎng)24小時(shí)后,觀察黃色格子為陽性結(jié)果,對(duì)照MPN表計(jì)數(shù)得出結(jié)果。