細菌活性化蛋白制備裂解液ZIKER
英文名:Bacterial Activity-Keeping Lysis Buffer
相關(guān)類別:蛋白裂解試劑與試劑盒
儲存:常溫下運輸,收到后,將溶液A在4℃的冰箱冷藏室中保存;溶液B和固體C在-20℃環(huán)境中保存,保質(zhì)期一年。
細菌活性化蛋白制備裂解液ZIKER產(chǎn)品簡介
一種比較溫和裂解細菌的方式,采用特殊的酶體系和溫和去污劑使樣品快速充分破裂,從而釋放蛋白質(zhì),內(nèi)含作用強烈的蛋白酶抑制劑,從而保證了蛋白的完整和zui大限度保持細菌內(nèi)蛋白的活性。合適用于細菌天然總蛋白,和重組的可溶解性蛋白質(zhì)的提取,提取的可溶性蛋白與適量的結(jié)合液混合后,可以直接用GST標簽的重組蛋白質(zhì)的提取。稀釋的本提取液也可以用于包含體的洗滌,提取的蛋白質(zhì)可以用于SDS-PAGE、1D、2D電泳、Western Blot、免疫共沉淀和酶活性分析等后續(xù)研究。每次可以處理20mg濕重的菌體。
操作步驟
1. 將固體 C 全部溶解在溶液 A 中。
2. 將過夜培養(yǎng)的細菌培養(yǎng)物大約 1.5 mL 8000 rpm(5700 g)離心 1 min。
3. 按照每 20mg 濕重加混合后的溶液 A1 mL 和溶液 B 10 μL。
4. 在渦懸震蕩器上震蕩 1 min,讓菌體充分懸浮。.
5. 37℃溫育 1 hour,直到溶液變澄清為止。
6. 8000 rpm 離心 5 min,轉(zhuǎn)移上清到一個新的離心管中,作為可溶性蛋白質(zhì)部分。
7. 沉淀加入 5 倍稀釋的混合后的溶液 A1 mL 和溶液 B 10 μL,在渦懸震蕩器上震蕩 1 min,靜置 30 min,中間偶爾顛倒混勻 2-3 次。再 8000 rpm 離心 5 min,去上清。
8. 重復7步驟1次。再用滅菌水洗滌包涵體沉淀,離心收集包涵體。
注意事項
1. 溶液A在4℃的冰箱冷藏室中保存,加入固體C后也應該在4℃的冰箱冷藏室中保存,盡量在一個月內(nèi)使用完畢。
2. 充分裂解后溶液中溶液是很透明,而且沒有粘稠度。
3. 電泳和Western Blot 時有分子量為14400 Da(等電點9.38)和31000 Da兩個額外條帶,但是不影響使用。
4. 使用后,請旋緊瓶蓋,防止溶液揮發(fā)和與空氣的物質(zhì)發(fā)生化學反應。
5. 本試劑只能夠用于體外實驗,不能夠用于臨床、治療和動物體內(nèi)實驗等,由此產(chǎn)生的后果概不承擔責任。
深圳子科生物科技有限公司還代理各大進口原裝品牌試劑,品牌有:Roche、Sigma、Amersco、Fluka、Wako、Merk、Qiagen、Mp、Immonoway、Invitrogen、Gibco、Biomiga、Peprotech、日本同仁、API、LIFE、Pierce、Thermo、TCI、RD,貨期短,價格有優(yōu)勢,渠道快捷,以絕大的優(yōu)勢和全國各大科研機構(gòu)、高校研究室達成合作關(guān)系,歡迎您!
相關(guān)產(chǎn)品如下:RC-094 Sodium Chloride 1kg RT 12 MONTHS
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RC-124 Potassium Chloride; KCl 1kg RT 12 MONTHS
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RC-126 Sodium Carbonate; Na2CO3 (anhydrous) 1kg RT 12 MONTHS
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