操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:ITGA5整合素A5酶聯(lián)免疫試劑盒
英文名稱:ITGA5 ELISA Kit
規(guī)格:48T/96
貨號(hào):CS-2016E
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成及試劑配制:
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
注意事項(xiàng):
1.試劑盒使用前請(qǐng)保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,請(qǐng)廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置,會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過(guò)50℃)使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器(使用zui低頻率),如無(wú)微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè)。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí),請(qǐng)按國(guó)家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
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蛋白2抗體Anti-APOA1 Antibody(原貨號(hào)PB0888)小鼠絨毛膜促性腺elisa檢測(cè)試劑盒
ITGA5整合素A5酶聯(lián)免疫試劑盒香茅 85%,FCC小鼠金屬硫蛋白1(MT-1)免疫試劑盒血管生成素相關(guān)蛋白5SPNS1 SPNS1抗體
肉桂 98%小鼠解整合素樣金屬蛋白9(ADAM9)免疫試劑盒錨蛋白重復(fù)域53抗體SPINT2/HAI2/HGFA Inhibitor 2 肝生長(zhǎng)因子激活抑制蛋白2抗體
(S)-(-)-β-香茅 99%小鼠解整合素樣金屬蛋白8(ADAM8)免疫試劑盒錨蛋白重復(fù)域54抗體SPINK1/SPINK3 腫瘤相關(guān)胰蛋白抑制劑1抗體
乙柏木酯 97%小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)免疫試劑盒ATP合成β5抗體SPINK1/SPINK3 腫瘤相關(guān)胰蛋白抑制劑1抗體
桂桂酯 ≥98%,Kosher小鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)免疫試劑盒肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白3抗體Spindly/CCDC99 亞砷鹽相關(guān)蛋白抗體
枯名 97%小鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)免疫試劑盒腺苷A2b受體/神經(jīng)生長(zhǎng)因子1受體抗體Spindlin 1 卵巢癌相關(guān)蛋白抗體
丁位癸內(nèi)酯 98%小鼠結(jié)蛋白(Des)免疫試劑盒肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白1抗體SPHK2 鞘氨激2抗體
鄰氨酯 98%小鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)免疫試劑盒β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體(X11β)SPHK2 鞘氨激2抗體
位癸內(nèi)酯 98%小鼠角化生長(zhǎng)因子(KGF/FGF-7)免疫試劑盒乙酰輔A結(jié)合蛋白抗體SPHK1 鞘氨激1抗體
鄰氨酯 ≥98%, FCC, Kosher小鼠角化內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)免疫試劑盒化分裂周期蛋白16抗體Sphingomyelin Synthase 1 鞘脂合成1抗體
正癸 98%小鼠膠質(zhì)系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)免疫試劑盒白血病相關(guān)蛋白AHI1抗體SPECC1L 質(zhì)和紡錘體機(jī)化蛋白A抗體
1,4-二氧 99%小鼠膠原I(Collagenase I)免疫試劑盒活化誘導(dǎo)胞嘧核苷脫氨抗體SPECA a-包襯蛋白抗體
一縮二 99%小鼠膠原吡交聯(lián)(PYD)免疫試劑盒三腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9抗體SPDYA 周期G2/M期快速誘導(dǎo)蛋白SPDYA抗體
一縮二 98%小鼠降鈣素原(PCT)免疫試劑盒ADP核糖化因子3抗體SP-D/PSPD 肺表面活性蛋白D抗體
癸 97%小鼠降鈣素因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒含氨酰tRNA合成結(jié)構(gòu)域1抗體SPC25 紡錘體點(diǎn)構(gòu)成蛋白25抗體