細(xì)胞名稱 抗補體C1抑制物小鼠雜交瘤細(xì)胞;7F12
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體,抗原為補體C1抑制物。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 保持細(xì)胞密度在1×105~1×106 cells/ml之間,每周換液2~3次
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
抗補體C1抑制物小鼠雜交瘤細(xì)胞;7F12實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項:
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
血管緊張素1-9(Ang1-9)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: Ang1-9 ELISA Kit
血管活性腸肽受體1(VIPR1)ELISA試劑盒 * ,英文名: VIPR1 ELISA Kit
血管非炎性蛋白3(VNN3)ELISA試劑盒 * ,英文名: VNN3 ELISA Kit
血管非炎性蛋白2(VNN2)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: VNN2 ELISA Kit
血管非炎性蛋白1(VNN1)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: VNN1 ELISA Kit
旋轉(zhuǎn)蛋白(RTTN)ELISA試劑盒 * ,英文名: RTTN ELISA Kit
旋光蛋白(OPTC)ELISA試劑盒 * ,英文名: OPTC ELISA Kit
序列相似家族5成員C(FAM5C)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: FAM5C ELISA Kit
序列相似家族3成員B(FAM3B)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: FAM3B ELISA Kit
序列相似家族20成員A(FAM20A)ELISA試劑盒 * ,英文名: FAM20A ELISA Kit
序列相似家族132成員A(FAM132A)ELISA試劑盒 * ,英文名: FAM132A ELISA Kit
嗅素4(OLFM4)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: OLFM4 ELISA Kit
嗅素3(OLFM3)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: OLFM3 ELISA Kit
嗅素2(OLFM2)ELISA試劑盒 * ,英文名: OLFM2 ELISA Kit
嗅素1(OLFM1)ELISA試劑盒 * ,英文名: OLFM1 ELISA Kit
嗅蛋白(Olfactorin)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: Olfactorin ELISA Kit
休眠蛋白(RSN)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: RSN ELISA Kit
雄烯酮(ADT)ELISA試劑盒 * ,英文名: ADT ELISA Kit
雄烯二醇(AED)ELISA試劑盒 * ,英文名: AED ELISA Kit
雄激素誘導(dǎo)蛋白1(AIG1)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: AIG1 ELISA Kit
胸腺因子(TF)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: TF ELISA Kit
β4(Tβ4)ELISA試劑盒 * ,英文名: Tβ4 ELISA Kit
β10(TMSβ10)ELISA試劑盒 * ,英文名: TMSβ10 ELISA Kit
胸腺生成素(TMPO)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: TMPO ELISA Kit
胸腺旁腺素(PTMS)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: PTMS ELISA Kit
胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)ELISA試劑盒 * ,英文名: TARC ELISA Kit
胸腺表達(dá)趨化因子(TECK)ELISA試劑盒 * ,英文名: TECK ELISA Kit
胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: BRAK ELISA Kit
胸苷酸合成酶(TYMS)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: TYMS ELISA Kit
胸苷嘧啶DNA糖基化酶(TDG)ELISA試劑盒 * ,英文名: TDG ELISA Kit
性別決定區(qū)Y框蛋白9(SOX9)ELISA試劑盒 * ,英文名: SOX9 ELISA Kit
性別決定區(qū)Y框蛋白3(SOX3)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: SOX3 ELISA Kit
性別決定區(qū)Y框蛋白2(SOX2)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: SOX2 ELISA Kit
性別決定區(qū)Y框蛋白18(SOX18)ELISA試劑盒 * ,英文名: SOX18 ELISA Kit
性別決定區(qū)Y框蛋白1(SOX1)ELISA試劑盒 * ,英文名: SOX1 ELISA Kit
興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白5(EAAT5)ELISA試劑盒 進(jìn)口分裝 ,英文名: EAAT5 ELISA Kit
興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白4(EAAT4)ELISA試劑盒 進(jìn)口原裝 ,英文名: EAAT4 ELISA Kit
興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白3(EAAT3)ELISA試劑盒 * ,英文名: EAAT3 ELISA Kit
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