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人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3（GLUT3）ELISA 試劑盒

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公司名稱上海語(yǔ)純生物科技有限公司
品牌
型號(hào)96T
所在地上海市
廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
更新時(shí)間2017/7/5 13:46:39
訪問(wèn)次數(shù)564

產(chǎn)品標(biāo)簽:

人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3（GLUT3）ELISA 試劑盒

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人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3（GLUT3）ELISA 試劑盒產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱：人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)ELISA 試劑盒

：135 64515386

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

Elisa試驗(yàn)在實(shí)驗(yàn)室中比較常見(jiàn)，那么elisa實(shí)驗(yàn)具體步驟怎么做，有沒(méi)有比較詳細(xì)的elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)呢？

Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)如下：

ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)1:用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10靏／ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱洗滌，下同）。

2.加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔）。

3.加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。

4.加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。 5.終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。 ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)二：用于檢測(cè)未知抗體的間接法：

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10靏／ml，每孔加0.1ml，4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。 2.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。（同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照）

3.于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。

4.于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘 5.于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml

6.可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。

ELISA 是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果判斷較客觀等因素，以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗(yàn)又可以用于少量標(biāo)本的檢測(cè)，既可以做定性試驗(yàn)也可以做定量分析等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)、腫瘤學(xué)和細(xì)胞因子等領(lǐng)域

人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)ELISA 試劑盒間接法簡(jiǎn)單操作步驟：

　?。?/span>1）、將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗原；

　　（2）、加稀釋的受檢血清，保溫反應(yīng)。血清中的特異抗體與固相抗原結(jié)合，形成固相抗原抗-體復(fù)合物；

　?。?/span>3）、加酶標(biāo)抗抗體；

　?。?/span>4）、加入酶促反應(yīng)底物，發(fā)生顯色反應(yīng)，顯色的深淺與待測(cè)抗體的量成正比。

ELISA試劑盒操作技術(shù)相關(guān)的注意事項(xiàng)：

(FAS/CD95)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min。

　　⑵ 加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí)，要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間，防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。

　　(3)封板溫育時(shí)，各孔一定要封嚴(yán)，防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。

　　(4)用洗板機(jī)洗板時(shí)，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干：還要防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過(guò)程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。

　　(5)合理安排檢測(cè)量，以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。

　　(6)加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。

　　(7)顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。

　　(8)加樣時(shí)保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。

(9)應(yīng)保證C清潔，整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至限度。從而提高檢測(cè)的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

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人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)ELISA 試劑盒 所生產(chǎn)銷售的各種ELISA試劑盒均采用的是定量夾心酶聯(lián)免疫技術(shù)?？贵w具體為FGF6已經(jīng)被預(yù)先涂到微孔板。標(biāo)準(zhǔn)和樣品吸入井和任何FGF6目前被綁定的固定化抗體。*共軛的抗體特異性FGF6除去任何未結(jié)合的物質(zhì)后，加入到孔中?？?蛋白共軛的辣根過(guò)氧化物酶（HRP）的洗滌后，加入到孔中。經(jīng)過(guò)洗滌，以除去任何未結(jié)合的抗*蛋白的酶試劑，底物溶液加入到孔中，顯色成比例的量的初始步驟中的約束的FGF6。彩色顯影被停止并測(cè)量的顏色的強(qiáng)度。

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