PAS染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)
PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)原理:
過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成雙醛基醛基進(jìn)而與Schiff氏液反應(yīng),使無色品紅變成紫紅染料而附著于含糖的組織上,通過白光成像設(shè)備可觀察到呈紅色的陽(yáng)性部位。
PAS染色說明:
1、細(xì)胞可做染色,貼壁細(xì)胞做爬片后染色,懸浮細(xì)胞做滴片后染色。
2、拍照倍數(shù)分100倍,200倍,400倍。正常情況下拍照是200倍3張,400倍3張。
3、全景掃描可看任意倍數(shù)。
染色實(shí)驗(yàn)步驟(僅供參考):
1、固定新鮮干燥的涂片用品5%乙醇固定10min,蒸餾水沖洗,待干;
2、如涂片需要消化,可加唾液或麥芽糖淀酶,置室溫消化60min,然后用蒸餾水沖洗;
3、10g/L高碘酸氧化15~20min,蒸餾水沖洗,待干;
4、置雪夫染液中室溫染色30~60min;
5、用亞硫酸溶液沖洗3次后,再用自來水沖洗2~3min,待干;
6、蒸餾水洗;
7、20g兒甲綠復(fù)染10~20min;
8、水洗,待干,鏡檢拍照。
注意事項(xiàng):
1、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2、試劑均應(yīng)低溫保存,臨用前半小時(shí)取出恢復(fù)室溫。
3、高碘酸處理溫度以不高于20℃為宜,室溫高時(shí),處理時(shí)間可適當(dāng)縮短。Schiff 染液染色時(shí)間可隨溫度調(diào)整,室溫高可減少染色時(shí)間,冬季室溫低,可延長(zhǎng)至20分鐘左右。第一次使用本試劑時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。
4、第一次使用本試劑時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。
PAS染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)