iFluor 680 Phalloidin iFluor 680標(biāo)記鬼筆環(huán)肽
產(chǎn)品標(biāo)簽
Phalloidin 鬼筆環(huán)肽；F-actin 肌動(dòng)蛋白（聚合）；G-actin 球形肌動(dòng)蛋白（單體）；Actin Polymerization 肌動(dòng)蛋白聚合；Cytochalasin細(xì)胞松弛素；CAS NO.：17466-45-4；
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
iFluor 680 Phalloidin iFluor 680標(biāo)記鬼筆環(huán)肽 | MX4414-300T | 300T | 1988 |
【溫馨提示】：見我司整理的鬼筆環(huán)肽及衍生物（Phalloidin and Phalloidin Conjugates）產(chǎn)品專題。
產(chǎn)品描述
鬼筆環(huán)肽（Phalloidin），又稱鬼筆鵝膏素，zui初是從毒蘑菇鬼筆鵝膏（Amanita phalloides）中分離到的一種七肽毒素，以*的親和力和特異性結(jié)合肌動(dòng)蛋白絲F-actin（聚合形式的肌動(dòng)蛋白），不會(huì)結(jié)合單體肌動(dòng)蛋白（G-actin）。不像肌動(dòng)蛋白抗體，同時(shí)識(shí)別單體和聚合形式的肌動(dòng)蛋白。鬼筆環(huán)肽對(duì)大小纖維的親和力相近，在許多不同的動(dòng)植物物種的肌肉和非肌肉細(xì)胞中，基本都按照一個(gè)肌動(dòng)蛋白亞基與一個(gè)鬼筆環(huán)肽分子的化學(xué)計(jì)量比結(jié)合。不像肌動(dòng)蛋白抗體，對(duì)不同物種或來源的肌動(dòng)蛋白親和力會(huì)發(fā)生明顯變化。鬼筆環(huán)肽的非特異性結(jié)合幾乎可忽略，染色和未染色區(qū)域的差異極其明顯。鬼筆環(huán)肽使得肌動(dòng)蛋白聚合/解離的臨界濃度降至1μg/ml，可用作一種聚合增強(qiáng)劑。另外，產(chǎn)生的復(fù)合物高度穩(wěn)定（解離常數(shù)約3×10–8 M），能夠抑制細(xì)胞松弛素、碘化鉀和溫度上升引起的去聚合和去組裝活性。
鬼筆環(huán)肽及其衍生物在納摩爾濃度即可對(duì)F-actin染色，且水溶性良好，是非常實(shí)用和方便的探針，對(duì)組織切片、細(xì)胞培養(yǎng)物或無細(xì)胞體系內(nèi)的F-actin進(jìn)行定性和定量研究。另外，鬼筆環(huán)肽及其衍生物很小，直徑約12–15 Å，分子量<2000 Da，經(jīng)標(biāo)記后的F-actin仍維持許多標(biāo)記前的功能。比如，標(biāo)記的甘油抽提肌纖維仍能收縮；標(biāo)記的肌動(dòng)蛋白絲仍能在固相肌球蛋白基質(zhì)中移動(dòng)。
本品為iFluor 680熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽（iFluor 680-Phalloidin），以凍干粉形式提供。按照100µl/孔（96孔板），總共可做300次。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1）選擇性染色F-actin，優(yōu)于抗體染色法，具更高的特異性和更低的非特異背景。
2）優(yōu)秀的熒光亮度和穩(wěn)定性，類同于Alexa Fluor 680-Phalloidin，Ex/Em=681/698nm。
3）優(yōu)化用于固定和透化處理樣本。
4）適用于多重標(biāo)記應(yīng)用，與其他熒光染料包括熒光蛋白、Qdot熒光納米晶和其他包括二抗在內(nèi)的熒光偶聯(lián)物*兼容。
注意事項(xiàng)
1）本品具有一定的毒性，LD50=2mg/kg，操作時(shí)請(qǐng)注意防護(hù)。
2）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作流程（免疫熒光染色）【詳見懋康整理】
有幾種方法都能用來染色組織細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)的肌動(dòng)蛋白絲（F-actin）染色，其中，固定步驟在獲得可信且具代表性的細(xì)胞F-actin分布情況中至關(guān)重要。固定步驟基于實(shí)驗(yàn)自身需求來選擇。多聚甲醛或戊二醛都能得到優(yōu)秀的F-actin染色和良好的板狀偽足維持保存。
一、實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備
二、染色工作液準(zhǔn)備
三、染色流程（以96孔板為例）
3.1 用黑框/透明底的96孔板進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，使其貼壁生長達(dá)到70-80%的匯合度。
3.2 吸掉培養(yǎng)液，用37℃預(yù)熱的1×PBS Buffer（pH 7.4）清洗細(xì)胞2次。
3.3 用溶于PBS的4%多聚甲醛固定細(xì)胞，室溫固定10-30min。【注意】：固定過程中甲醇能破壞肌動(dòng)蛋白，因此，固定液中避免接觸任何甲醇。的固定液是無甲醇的甲醛。
3.4 用1×PBS Buffer清洗細(xì)胞2-3次，室溫下30s/次。
3.5 用破膜緩沖液透化細(xì)胞，室溫處理5min。
3.6 用1×PBS Buffer清洗細(xì)胞2-3次，室溫下30s/次。
3.7 取100μl 現(xiàn)配的iFluor 680 Phalloidin染色工作液到每個(gè)孔內(nèi)，室溫避光孵育30-90min。
【注意】：若有需要，此時(shí)可加入即用型DAPI染色液或其他不同于iFluor 488熒光光譜的細(xì)胞核染色液。
3.8 用1×PBS Buffer清洗細(xì)胞2-3次，室溫下30s/次。
3.9 加抗熒光淬滅劑（如Fluoromount-GTM，Cat# MM1401）到孔內(nèi)保護(hù)熒光。
3.10 熒光顯微鏡下觀察染色結(jié)果，選擇iFluor 680激發(fā)/發(fā)射濾片（Ex/Em=681/691nm）。若做細(xì)胞核染色，選擇合適濾片，比如DAPI激發(fā)/發(fā)射濾片（Ex/Em=364/454nm）。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | Ex/Em | 分子量 |
MX4401-1MG | Phalloidin | 1mg | N/A | ~788.87 |
MX4402-1MG | Amino Phalloidin | 1mg | N/A | ~901.91 |
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MX4405-300T | TRITC Phalloidin | 300T | 546/575 | ~1000 |
MX4407-1MG | 5-TAMRA Phalloidin | 1mg | 546/575 | ~1200 |
MX4408-300T | iFluor™ 350 Phalloidin | 300T | 353/442 | ~1000 |
MX4409-300T | iFluor™ 405 Phalloidin | 300T | 400/421 | ~1400 |
MX4410-300T | iFluor™ 488 Phalloidin | 300T | 492/518 | ~1900 |
MX4411-300T | iFluor™ 555 Phalloidin | 300T | 556/574 | ~1300 |
MX4412-300T | iFluor™ 594 Phalloidin | 300T | 590/618 | ~1600 |
MX4413-300T | iFluor™ 647 Phalloidin | 300T | 650/665 | ~2200 |
MX4414-300T | iFluor™ 680 Phalloidin | 300T | 681/698 | ~2700 |
MX4415-300T | iFluor™ 790 Phalloidin | 300T | 787/808 | ~2800 |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作，主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
iFluor 680 Phalloidin 鬼筆環(huán)肽近紅 Actin熒光探針與細(xì)胞染色
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