CELL-WISE 293無血清培養(yǎng)基生產廠家*,293細胞培養(yǎng)基;無血清培養(yǎng)基;懸浮細胞培養(yǎng)基;無血清培養(yǎng);細胞培養(yǎng);HEK細胞培養(yǎng);Balance CD 293 培養(yǎng)基;懸浮培養(yǎng);高密度懸浮無血清培養(yǎng)基;無抗生素培養(yǎng)基;
CELL-WISE的293培養(yǎng)基是徠創(chuàng)生物自主研發(fā)的一款培養(yǎng)基,*的質量,平民的價格。全國誠招代理商,歡迎廣大新老客戶前來咨詢。
CELL-WISE 293無血清培養(yǎng)基生產廠家*信息:
品牌 | 產品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 報價(RMB) |
CELL-WISE | BalanceCD293 培養(yǎng)基 | CW01001 | 1L | 400 |
產品描述:
Balance CD 293 培養(yǎng)基適用于懸浮培養(yǎng)條件下的HEK293細胞(如293-F,293-T, Expi-293F
等)的高密度生長和瞬時轉染表達。 Balance CD 293 培養(yǎng)基含有細胞生長所需的全部營養(yǎng)成份,無需添加任何添加物即可使用。(注意:此培養(yǎng)基不包含抗生素以及血清)
293無血清培養(yǎng)基產品特點:
瞬時轉染培養(yǎng)基,適用于HEK293細胞高密度懸浮培養(yǎng)
無蛋白、無動物源、化學成分限定
即用型*培養(yǎng)基,無需添加額外成分
CELL-WISE的293無血清培養(yǎng)基技術參數:
外觀: | 澄清透明紅色液體 |
滲透壓: | 275±15 mOSM |
pH: | 6.9-7.4 |
無菌檢測: | 無菌 |
內毒素: | <5 EU/mL |
儲存條件: | 2-8℃,避光 |
效期: | 12個月 |
產品用途: | 僅用于科學研究,不適用于人類或動物的診斷和治療 |
CELL-WISE的293無血清培養(yǎng)基使用方法:
細胞馴化
1)直接馴化
大部分情況下,培養(yǎng)于其他培養(yǎng)基中的細胞,可以直接適應Balance CD 293 medium,只要按照日常傳代方式(稀釋)更換培養(yǎng)基即可。
2)漸進式馴化
注意:選用低代次、處于對數生*的細胞進行馴化
①在原培養(yǎng)基中復蘇細胞并繼續(xù)使用該培養(yǎng)基傳代2到3次至細胞生長穩(wěn)定,當細胞密度達到2x10 6 cells/ml后進行傳代,傳代細胞密度控制在0.5-0.6×10 6 cells/mL,5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為75:25;
②將細胞置于37℃,5% CO2,轉速為110-175 rpm的恒溫搖床中進行培養(yǎng);
③當細胞密度3-4天后達到3x10 6 cells/ml且細胞活率>90%,傳代時5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為50:50,細胞密度控制在0.5×10 6 cells/mL。如細胞生長慢,可離心上清,留20%條件培養(yǎng)基,加入80%的5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293 培養(yǎng)基比例為75:25的混合培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng);
④重復步驟③逐步增加Balance CD 293培養(yǎng)基所占的比例(5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293 培養(yǎng)基的比例為25:75至10:90)直到*的Balance CD 293培養(yǎng)基;
⑤經過在*的 Balance CD 293 培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng),傳代后3-4天細胞的密度可以達到2-3×10 6 cells/mL,細胞活率大于90%,這說明細胞已經*適應了Balance CD 293 培養(yǎng)基。之后進行細胞的傳代培養(yǎng)時,細胞的起始密度可以降到0.3×10 6 cells/mL,一般傳代2-3次后再進行轉染實驗。
注意: 一般細胞馴化過程中,前三代細胞的狀態(tài)可能不是很好,但一般從第四代狀態(tài)會有改善。
細胞傳代
1)取細胞培養(yǎng)樣品,人工或儀器測定細胞密度以及活率;
2)計算傳代所需的細胞用量,建議起始細胞密度為0.2-0.4×10 6 cells/mL。建議復蘇的細胞至少培養(yǎng)兩代后再用于其他用途。傳代培養(yǎng)體積建議為15-20 mL(100 mL的培養(yǎng)瓶)或50-60 mL(250 mL 的培養(yǎng)瓶);
3)將細胞置于37℃,5%CO2,轉速為110-175 rpm的恒溫搖床中進行培養(yǎng),3-4天傳代一次。
細胞轉染在Balance CD 293培養(yǎng)基中,采用商業(yè)化轉染試劑(例如 Gibco 293Fectin™ExpiFectamine™ 293 Transfection Kit )或 PEI 可以實現對 HEK293 細胞的高效轉染。