PikoOrange蛋白定量試劑盒
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 保存 | 價格(元) |
PikoOrange 蛋白定量試劑盒 | D1101L1128 | 100 assays | 室溫 | 180 |
產(chǎn)品描述
PikoOrange Protein Quantitation Kit是一個高度敏感的基于熒光技術(shù)定量純化蛋白質(zhì)的試劑盒,其檢測蛋白濃度范圍為0.1-15 ug/ml。比起傳統(tǒng)定量方法如BCA、Bradford或Lowry蛋白定量分析,敏感性更佳,此外,與NanoOrange蛋白質(zhì)定量測定技術(shù)相比具有更加優(yōu)秀的線性和重現(xiàn)性。可顯示不同蛋白質(zhì)之間的zui小變異性,且熒光信號穩(wěn)定長達(dá)16小時;其受測樣本不論為純化蛋白或抗體皆適用。 需特別注意的是,PikoOrange對鹽類、緩沖液、去垢劑或是其他化學(xué)物質(zhì)都有不同程度的耐受性(表2)。 產(chǎn)品組分
技術(shù)參數(shù) Ex/Em 480/598 nm (結(jié)合BSA)。 運輸和保存方法 室溫保存,不要冷藏PikoOrange緩沖液。PikoOrange Dye需避光保存,產(chǎn)品可穩(wěn)定保存至少12個月。如果緩沖液出現(xiàn)沉淀,可加熱到37℃并漩渦溶解。如果長時間不用,組分C應(yīng)避光保存在4℃。 使用方法 1、準(zhǔn)備1x PikoOrange緩沖液: 1:10 稀釋10x緩沖液在dH2O。例如,添加1 mL10x 緩沖液至9 mL dH2O. 1 x PikoOrange緩沖液可以儲存在室溫下。 2、使用前準(zhǔn)備PikoOrange工作液:將500xPikoOrange染料按1:500用1x PikoOrange緩沖液稀釋。例如,添加10 uL 500xPikoOrange染料值5 mL 1x PikoOrange緩沖液。 注意:您將需要大約3 mL工作液制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(見表1)以及每孔檢測樣品250 ul工作液。 3、準(zhǔn)備未知樣本:10 uL 樣本添加 250 uLPikoOrange工作液。 注意:您可能需要稀釋未知樣本的得到不同濃度的樣本。樣品稀釋可能會減少干擾物質(zhì)的影響。 4、準(zhǔn)備一個蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線所需的BSA濃度,如表1所示。 5、樣本和標(biāo)準(zhǔn)蛋白加熱至90- 95℃ 10分鐘,此過程需避光操作。 6、取出樣本室溫避光放置20分鐘冷卻。短時間離心以收集全部樣本。 7、每個標(biāo)準(zhǔn)樣品或未知樣品取200 uL轉(zhuǎn)移到96孔酶標(biāo)板,熒光酶標(biāo)儀讀數(shù)。激發(fā)/發(fā)射波長為480/598 nm。 注意:另外,樣品可以被轉(zhuǎn)移到熒光試管使用熒光儀測量。如果需要超過200 uL體積測量,等比例放大配置方案。
表1:準(zhǔn)備BSA樣品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線
表2:PikoOrange對不同化學(xué)物質(zhì)的耐受性
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