Hoechst 33342 *超級(jí)純*
產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 保存 | 價(jià)格(元) |
Hoechst 33342 *超級(jí)純* | A5430L2670 | 5 mL(20mM) | -20℃ | 1368 |
產(chǎn)品描述
Hoechst 33342是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對(duì)細(xì)胞的毒性較低，在嵌入雙鏈DNA后釋放強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光。Hoechst 系列染料因與DNA結(jié)合的特性，也常被用來(lái)進(jìn)行線粒體DNA的觀察。Hoechst33258和Hoechst33342是兩種非常相近的Hoechst染料，他們都在紫外段350nm被激發(fā)，發(fā)射波長(zhǎng)都為461nm，兩種染料經(jīng)常被用來(lái)替代另一種熒光染料DAPI. Hoechst 33342比33258具有更強(qiáng)的親脂性，因此能更好的透過(guò)完整的細(xì)胞膜，在部分實(shí)驗(yàn)中Hoechst33258的細(xì)胞透過(guò)性存在明顯不足。用于細(xì)胞核染色時(shí)，*的Hoechst 33342工作終濃度為0.5-5μM，在一些敏感性實(shí)驗(yàn)時(shí)，設(shè)置多個(gè)染色濃度，以獲得染色效果。
技術(shù)參數(shù)
光學(xué)性質(zhì)：Ex(nm)：350 Em(nm)：461
化學(xué)參數(shù)：分子量：561.93 溶劑：Water CAS：23491-52-3
使用方法
1.緩沖液制備。用PBS或合適的緩沖液制備10～50μM Hoechst 33342染色液。
2.固定的細(xì)胞或組織染色。對(duì)于固定的細(xì)胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑。依次按步驟進(jìn)行免疫熒光染色，和Hoechst33342染色。如果不進(jìn)行免疫熒光染色，則直接按步驟進(jìn)行Hoechst33342染色。
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片：加入適量Hoechst 33342染色液，覆蓋住樣品即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞：至少加入待測(cè)染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。
b)吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
c)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長(zhǎng)350nm，發(fā)射波長(zhǎng)461nm。
3.活細(xì)胞或組織染色
a)細(xì)胞培養(yǎng)物中加入適量Hoechst 33342染色液，約1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對(duì)于六孔板一個(gè)孔需加入1ml染色液，對(duì)于96孔板一個(gè)孔需加入100μl染色液。
b)在37℃培養(yǎng)細(xì)胞10～20分鐘。
c)用PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。
d)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長(zhǎng)350nm，發(fā)射波長(zhǎng)461nm。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋（wet ice）運(yùn)輸。-20℃干燥避光保存，保質(zhì)期12個(gè)月。
注意事項(xiàng)
1. Hoechst 33342溶于水，溶解度可達(dá)20μM(約10mg/ml)。您也可直接購(gòu)買(mǎi)20μM的液體規(guī)格產(chǎn)品（貨號(hào):A5430L2670）。
2. Hoechst 33342對(duì)人體有一定刺激性，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
3. 熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。
4. 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
相關(guān)產(chǎn)品
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 保存 | 價(jià)格（元） |
A5430L2670 | 5 mL(20mM) | -20℃ | 1368 | |
A5430L2671 | 1 g | -20℃ | 5200 | |
A5430L2672 | 100 mg | -20℃ | 1200 |
