標(biāo)記抗體的原理:
目前較為常用的標(biāo)記抗體的方法,FITC一般呈黃色、褐色或褐黃色粉末或結(jié)晶,性質(zhì)穩(wěn)定在低溫中能保存數(shù)年。在堿性條件下,FITC的碳酰胺鍵可與抗體蛋白上的賴氨酸氨基共價結(jié)合,形成FITC-蛋白質(zhì)結(jié)合物,即熒光抗體或熒光結(jié)合物。一個抗體分子上最多能標(biāo)記15~20個FITC分子,被標(biāo)記的抗體仍能保持與相應(yīng)抗原結(jié)合的能力,在熒光燈源紫外線或藍(lán)紫光激發(fā)下產(chǎn)生黃綠色熒光,通過熒光顯微鏡進(jìn)行觀察或利用流式細(xì)胞儀分析,從而對抗原進(jìn)行定性、定位或定量。
產(chǎn)品名稱 | 磷酸化非受體性蛋白激酶ETK抗體說明 |
英文名稱 | Phospho-BMX (Tyr556) |
貨號 | BJ-K96773 |
抗體的種類:
抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的,體液性抗體由B淋巴細(xì)胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對免疫球蛋白G、A、M、E了解較多,對D的功能了解較少。
(1) IgG:是血清中濃度的一類球蛋白,約占免疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血漿。機(jī)體受到抗原初次刺激后,其產(chǎn)生時間僅次于IgM。在抗體介導(dǎo)的抗感染免疫中起主要作用。IgG是球蛋白單體,分子量16萬~18萬,可以通過兔的胎盤,但不能通過豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗細(xì)菌、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。
(2) IgM:由5個球蛋白單位組成的五聚體,在血清中的含量僅次于IgG,分子量90萬,是體內(nèi)的球蛋白。抗原初次刺激機(jī)體后,IgM出現(xiàn)最早,在血清中的含量僅次于IgG,主要分布在血管內(nèi),可以通過激活補(bǔ)體發(fā)揮溶菌、溶細(xì)胞及中和病毒的作用。因其是五聚體,免疫作用很強(qiáng),是IgG的100倍,但由于含量僅為IgG的1/10,且持續(xù)時間短,所以在抗感染免疫中不能起主要作用。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與凝集反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)。
(3) IgA:有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中,分子量約為17萬,亦稱為血清型IgA,有抗菌和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中,如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液,以初乳中的含量。雙體IgA亦稱為分泌型IgA,由存在于粘膜和組織上的漿細(xì)胞產(chǎn)生,分子量40萬,含量較單體高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止細(xì)菌或病毒吸附于粘膜表面。
(4) IgE:是一種特殊的糖蛋白,為單位體結(jié)構(gòu),分子量19萬,由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部淋巴結(jié)中的漿細(xì)胞所形成,在血清中含量甚微,是一種致敏抗體,容易吸附在細(xì)菌表面,當(dāng)與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過敏反應(yīng)。在機(jī)體抵抗細(xì)菌和病毒的感染中幾乎無作用。多克隆抗體制備過程:
蛋白抗原
↘抗原準(zhǔn)備→兔、小鼠免疫→抗血清→抗體純化 →鑒定(ELISA、WB、IHC)
多肽偶聯(lián) ↗ (抗原親和純化)
從細(xì)胞中提取出來的生物大分子是不純凈的,必須進(jìn)一步分離純化才能獲得純品。在生物大分子制備工作中,分離純化是比較復(fù)雜和重要的一個環(huán)節(jié)。對于異類的物質(zhì),如提純蛋白質(zhì)和酶時混雜著核酸,提純核酸時混雜著蛋白質(zhì)或多糖,一般可用專一性酶水解、有機(jī)溶劑抽提、選擇性分部沉淀等方法處理,小分子物質(zhì)常在整個制備過程中多次液相與固相互相轉(zhuǎn)化被分離或用透析方法除去。而對同類物質(zhì),如酶和雜蛋白,RNA和DNA以及不同結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)、酶、核酸之間的分離,情況則復(fù)雜得多,主要應(yīng)用的方法有電泳法、超速離心法、鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法、吸附法、結(jié)晶法、電點(diǎn)沉淀法、柱層析法
抗原抗體反應(yīng)影響因素:
(一)反應(yīng)物自身的因素
5) 抗體:不同來源的抗體,反應(yīng)性各有差異,抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應(yīng),為提高試驗(yàn)的可靠性,應(yīng)選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑.等價帶的寬窄也影響抗原抗體復(fù)合物的形成,單克隆抗體不適用于沉淀反應(yīng).
6) 抗原:抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數(shù)目均可影響反應(yīng)結(jié)果.顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應(yīng),可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應(yīng),單價抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象.
(二)反應(yīng)環(huán)境條件
7) 酸堿度:抗原抗體反應(yīng)必須在合適的pH環(huán)境中進(jìn)行.蛋白質(zhì)具有兩性電離性質(zhì),因此每種蛋白質(zhì)都有固定的等電點(diǎn).抗原抗體反應(yīng)一般在pH6~9進(jìn)行,有補(bǔ)體參與的反應(yīng)pH為7.7.4,pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應(yīng).
8) 溫度:在一定范圍內(nèi),溫度升高可加速分子運(yùn)動,抗原與抗體碰撞機(jī)會增多,使反應(yīng)加速.一般為15℃~40℃,常用的抗原抗體反應(yīng)溫度為37℃,溫度如高于56℃,可導(dǎo)致已結(jié)合的抗原抗體再解離,甚至變性或破壞.每種試驗(yàn)都有其*的最適反應(yīng)溫度要求.此外,適當(dāng)振蕩也可促進(jìn)抗原抗體分子的接觸,加速反應(yīng).
9) 電解質(zhì):抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合后,雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體,若溶液中無電解質(zhì)參加,仍不出現(xiàn)可見反應(yīng).為了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液.
臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C鄰硝基本-α-D-葡萄糖苷shēng huà shì jì容量:100克
CMA1 Others Human CMA1 / Chymase 1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,4,6-三基本安 2,4,6-Trimqthylcnilinq 1988-2-1
草魚腎細(xì)胞;GIK鋅shēng huà shì jì容量:RT5克
T24細(xì)胞,膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 高分化鱗癌細(xì)胞,HCC細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0908堿式碳酸鋅shēng huà shì jì容量:50毫升
615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM75566-99-92-2-Naphthaldehyde
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1VISIGLOPLUSAPCHEMILUMSUBSTRATE堿性嶙酸酶化學(xué)發(fā)光底物100MLCOLD
ACE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-聯(lián)本硼醋,98% Biphqnyl-3-boronic ccid 21-92-
CL-0213SK-MES-1(肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2URIDINE尿苷超級
NCI-H446細(xì)胞,小細(xì)胞肺癌 血液白血病細(xì)胞,TF-1細(xì)胞 肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-BE13-硝基本以酮,英文名或英文縮寫:3′-nitnoacetopxenone,級別:CP,99%,規(guī)格:100克
A549(非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2PEG8000 200g/500g Amresco分裝
磷酸化非受體性蛋白激酶ETK抗體說明非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1殺螟丹標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=3%)Aramite solution質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=3%
SKOV3 [SK-OV-3], 卵巢癌腺癌細(xì)胞系莎稗1(標(biāo)準(zhǔn)品)Anilofos質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%
B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS 大鼠胰島細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLAmberlite® IRA410 離子交換樹脂(719(202)是高等級凝膠強(qiáng)堿Ⅱ型陰離子交換樹脂)Amberlite® IRA-410 ion-exchange resin質(zhì)量規(guī)格:719(202)是高等級凝膠強(qiáng)堿Ⅱ型陰離子交換樹脂
外周血白細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)1酸二氫銨(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于凱氏定氮法氮測定,≥99.5%)Ammonium phosphate monobasic質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于凱氏定氮法氮測定,≥99.5%
APLP1 Others Human APLP1 / Amyloid-like protein 1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1酸二氫銨(for HPLC,≥99.0%(T))Ammonium phosphate monobasic質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0%(T)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,價格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。