操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
中文名稱:高純質(zhì)粒小提試劑盒(1~5mL)
英文名稱:PlasmidPure Mini Kit(1~5mL)
產(chǎn)品規(guī)格:200次
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號:BJ-F0163409
生物醫(yī)學(xué)實驗中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品介紹:
本試劑盒適合提取1~5mL菌液,在堿裂解法裂解細(xì)胞的基礎(chǔ)上,采用*的硅基質(zhì)膜吸附技術(shù)和試劑配方,通過離心吸附柱在高鹽狀態(tài)下高效專一的結(jié)合溶液中的質(zhì)粒DNA,每個吸附柱高可吸附30μg的質(zhì)粒DNA,并大限度的去除蛋白質(zhì)、基因組、RNA和其他雜質(zhì)。得到的質(zhì)粒DNA可直接用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染、PCR、酶切、測序、連接等生物學(xué)實驗。 儲存條件:室溫(15~30℃)。 自備試劑:無水乙醇。 實驗前準(zhǔn)備及重要注意事項: 所有組分可在干燥、室溫(15~30℃)環(huán)境穩(wěn)定保存1年,將吸附柱置于2~8℃可保存更長時間,加入RNase A的Buffer P1置于2~8℃可穩(wěn)定保存6個月。 次使用前,將RNase A溶液全部加入到Buffer P1中,混勻,置于2~8℃保存,使用前需在室溫中放置一段時間,恢復(fù)至室溫后使用。 次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明在Buffer PW中加入無水乙醇。 使用前若發(fā)現(xiàn)Buffer P2、Buffer N3、Buffer PB有沉淀,可在37℃水浴幾分鐘,即可恢復(fù)澄清(請勿劇烈晃動Buffer P2)。 注意不要直接接觸Buffer P2、Buffer N3和Buffer PB,使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子。 提取質(zhì)粒的量和純度與細(xì)菌培養(yǎng)濃度、菌株種類、質(zhì)粒大小、質(zhì)??截悢?shù)等因素有關(guān)。 操作步驟: 取1~5mL過夜培養(yǎng)的菌液加入離心管(自備)中,13000rpm(~16200×g)離心30秒收集菌體沉淀,盡量吸棄上清。 向留有菌體沉淀的離心管中加入250μL Buffer P1(請先檢查是否已加入RNase A),使用移液器或渦旋振蕩器充分混勻,懸浮菌體沉淀。 注意:如果菌塊未*混勻,將會影響裂解效果,導(dǎo)致提取量和純度偏低。 向離心管中加入250μL Buffer P2,溫和地上下顛倒混勻4~6次,充分混勻使菌體裂解,此時溶液應(yīng)變得清亮粘稠。 注意:溫和混勻,不要劇烈震蕩,以免打斷基因組DNA,造成提取的質(zhì)粒中混有基因組DNA片段。 此步驟所用時間應(yīng)不過5分鐘,避免質(zhì)粒受到破壞。 向離心管中加入350μL Buffer N3,立即溫和地上下顛倒混勻8~10次,充分混勻,此時應(yīng)出現(xiàn)白色絮狀沉淀。13000rpm離心5分鐘。 注意:Buffer N3加入后應(yīng)立即混勻,避免產(chǎn)生局部沉淀。 將步驟4中所得的上清液轉(zhuǎn)移到已裝入收集管的吸附柱DM中,13000rpm離心30秒鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。 向吸附柱中加入150μL Buffer PB,13000rpm離心30秒。 向吸附柱中加入400μL Buffer PW(請先檢查是否已加入無水乙醇),13000rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液。 將吸附柱置于一個新的離心管(自備)中,向吸附膜的中間部位加入50~100μL Buffer EB,室溫放置2分鐘,13000rpm離心1分鐘,將質(zhì)粒溶液收集到離心管中。-20℃保存質(zhì)粒。 注意: 1)為了增加質(zhì)粒的回收效率,可將得到的溶液重新加入到吸附柱中,室溫放置2分鐘,13000rpm離心1分鐘,將質(zhì)粒溶液收集到離心管中。 2)質(zhì)粒拷貝數(shù)較低或>10kb時,Buffer EB在65~70℃水浴預(yù)熱,可以增加提取效率。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
真菌/酵母細(xì)胞亞硝酸鹽還原酶總活性比色法定量檢測試劑盒
藻類細(xì)胞亞硝酸鹽還原酶總活性比色法定量檢測試劑盒
植物鐵型亞硝酸鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒
真菌/酵母細(xì)胞鐵型亞硝酸鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒
藻類細(xì)胞鐵型亞硝酸鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒
山羊生長激素釋放多肽elisa 山羊生長激素釋放多肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 山羊生長激素釋放多肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:山羊生長激素釋放多肽試劑盒、山羊生長激素釋放多肽elisa 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid 99469-99-5 中文名: 分子式:C13H16O5
山羊生長激素釋放多肽(GHRP)elisa 3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)nitrobenzene 中文名: 分子式:C13H9ClFNO3
山羊生長激素釋放多肽(GHRP)ELISAKit 3-Benzyl-5-(2-hydroxyethyl)-4-methylthiazolium chloride 4568-71-2 中文名:3-芐基-5-(2-)-4-甲基氯化噻唑鎓 分子式:C13H16ClNOS
山羊 英文名稱: Coisol 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: CO 3-Ethoxya-3,5-dien-17β-ol 26614-48-2 中文名:3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇 分子式:C21H32O2
山羊內(nèi)啡肽(EP)elisa 3H-1,2-Benzodithiol-3-one-1,1-dioxide 66304-01-6 中文名:3H-1,2-苯并二硫醇-3-酮-1,1-二氧化物 分子式:C7H4O3S2
高純質(zhì)粒小提試劑盒(1~5mL)D-α-氨基己二酸 D-a-Aminoadipic acid 質(zhì)量規(guī)格:0.97 英文名稱RatinducibleniicoxidesyhaseELISAKIT大鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)規(guī)格:96T/48T
D-高苯丙 D-Homophenylalanine 質(zhì)量規(guī)格:>90%(T),BR 高效液相色譜(HPLC)分析20樣本
D-焦谷 D-Pyroglutamic acid 質(zhì)量規(guī)格:0.98 ELISAKitOSM人抑瘤素M規(guī)格:48T/96T
D-環(huán)丙基丙 D-Cyclopropylalanine 質(zhì)量規(guī)格:BR 小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)elisa ,英文名: M-CSF ELISA Kit
D-叔亮鹽酸鹽 D-tert-Leucine 質(zhì)量規(guī)格:BR,98.5% 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA檢測試劑盒RatAquaporin5,AQP-5ELISAKit 96T/48T
D-正纈 D-Norvaline 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人催產(chǎn)素(OT)試劑盒 Human oxytocin,OT ELISA Kit
D-苯丙甲酯鹽酸鹽 H-D-Phe-OMe·HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Raetinol-bindingprotein,RBPELISAKit大鼠醇結(jié)合蛋白(RBP)elisa規(guī)格:96T/48T
N-乙酰-D-谷 Ac-D-Glu-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Hollande固著液50毫升
CBZ-D-亮 Z-D-Leu-OH 質(zhì)量規(guī)格:BR,>98%,油狀 MouseVitaminB6,VB6elisa小鼠B6(VB6)elisa規(guī)格:96T/48T
D-別異亮 D-allo-Isoleucine 質(zhì)量規(guī)格:0.98 小鼠巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa ,英文名: MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。