標記抗體的原理:
目前較為常用的標記抗體的方法,FITC一般呈黃色、褐色或褐黃色粉末或結(jié)晶,性質(zhì)穩(wěn)定在低溫中能保存數(shù)年。在堿性條件下,FITC的碳酰胺鍵可與抗體蛋白上的賴氨酸氨基共價結(jié)合,形成FITC-蛋白質(zhì)結(jié)合物,即熒光抗體或熒光結(jié)合物。一個抗體分子上最多能標記15~20個FITC分子,被標記的抗體仍能保持與相應(yīng)抗原結(jié)合的能力,在熒光燈源紫外線或藍紫光激發(fā)下產(chǎn)生黃綠色熒光,通過熒光顯微鏡進行觀察或利用流式細胞儀分析,從而對抗原進行定性、定位或定量。
產(chǎn)品名稱 | 自噬相關(guān)蛋白8A抗體說明 |
英文名稱 | APG8A |
貨號 | BJ-K97017 |
抗體的種類:
抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的,體液性抗體由B淋巴細胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對免疫球蛋白G、A、M、E了解較多,對D的功能了解較少。
(1) IgG:是血清中濃度的一類球蛋白,約占免疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血漿。機體受到抗原初次刺激后,其產(chǎn)生時間僅次于IgM。在抗體介導的抗感染免疫中起主要作用。IgG是球蛋白單體,分子量16萬~18萬,可以通過兔的胎盤,但不能通過豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗細菌、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學反應(yīng)中,參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。
(2) IgM:由5個球蛋白單位組成的五聚體,在血清中的含量僅次于IgG,分子量90萬,是體內(nèi)的球蛋白。抗原初次刺激機體后,IgM出現(xiàn)最早,在血清中的含量僅次于IgG,主要分布在血管內(nèi),可以通過激活補體發(fā)揮溶菌、溶細胞及中和病毒的作用。因其是五聚體,免疫作用很強,是IgG的100倍,但由于含量僅為IgG的1/10,且持續(xù)時間短,所以在抗感染免疫中不能起主要作用。在體外的血清學反應(yīng)中,參與凝集反應(yīng)和補體結(jié)合反應(yīng)。
(3) IgA:有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中,分子量約為17萬,亦稱為血清型IgA,有抗菌和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中,如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液,以初乳中的含量。雙體IgA亦稱為分泌型IgA,由存在于粘膜和組織上的漿細胞產(chǎn)生,分子量40萬,含量較單體高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止細菌或病毒吸附于粘膜表面。
(4) IgE:是一種特殊的糖蛋白,為單位體結(jié)構(gòu),分子量19萬,由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部淋巴結(jié)中的漿細胞所形成,在血清中含量甚微,是一種致敏抗體,容易吸附在細菌表面,當與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過敏反應(yīng)。在機體抵抗細菌和病毒的感染中幾乎無作用。多克隆抗體制備過程:
蛋白抗原
↘抗原準備→兔、小鼠免疫→抗血清→抗體純化 →鑒定(ELISA、WB、IHC)
多肽偶聯(lián) ↗ (抗原親和純化)
從細胞中提取出來的生物大分子是不純凈的,必須進一步分離純化才能獲得純品。在生物大分子制備工作中,分離純化是比較復雜和重要的一個環(huán)節(jié)。對于異類的物質(zhì),如提純蛋白質(zhì)和酶時混雜著核酸,提純核酸時混雜著蛋白質(zhì)或多糖,一般可用專一性酶水解、有機溶劑抽提、選擇性分部沉淀等方法處理,小分子物質(zhì)常在整個制備過程中多次液相與固相互相轉(zhuǎn)化被分離或用透析方法除去。而對同類物質(zhì),如酶和雜蛋白,RNA和DNA以及不同結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)、酶、核酸之間的分離,情況則復雜得多,主要應(yīng)用的方法有電泳法、超速離心法、鹽析法、有機溶劑沉淀法、吸附法、結(jié)晶法、電點沉淀法、柱層析法
抗原抗體反應(yīng)影響因素:
(一)反應(yīng)物自身的因素
5) 抗體:不同來源的抗體,反應(yīng)性各有差異,抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應(yīng),為提高試驗的可靠性,應(yīng)選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑.等價帶的寬窄也影響抗原抗體復合物的形成,單克隆抗體不適用于沉淀反應(yīng).
6) 抗原:抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數(shù)目均可影響反應(yīng)結(jié)果.顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應(yīng),可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應(yīng),單價抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象.
(二)反應(yīng)環(huán)境條件
7) 酸堿度:抗原抗體反應(yīng)必須在合適的pH環(huán)境中進行.蛋白質(zhì)具有兩性電離性質(zhì),因此每種蛋白質(zhì)都有固定的等電點.抗原抗體反應(yīng)一般在pH6~9進行,有補體參與的反應(yīng)pH為7.7.4,pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應(yīng).
8) 溫度:在一定范圍內(nèi),溫度升高可加速分子運動,抗原與抗體碰撞機會增多,使反應(yīng)加速.一般為15℃~40℃,常用的抗原抗體反應(yīng)溫度為37℃,溫度如高于56℃,可導致已結(jié)合的抗原抗體再解離,甚至變性或破壞.每種試驗都有其*的最適反應(yīng)溫度要求.此外,適當振蕩也可促進抗原抗體分子的接觸,加速反應(yīng).
9) 電解質(zhì):抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合后,雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體,若溶液中無電解質(zhì)參加,仍不出現(xiàn)可見反應(yīng).為了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液.
IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 細胞裂解液 (陽性對照) LeucomalachiteGreen無色孔雀石綠100克BS
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA?;o酶A氧化酶 Acyl Coenzyme A Oxidase (10-40 units/mg) 61116-22-1 500UN 通用試劑
AR42J細胞,胰腺細胞 皮膚成纖維細胞系,BJ細胞 小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]全;福爾馬林;福美林;全水;蟻全溶液 ForMclin 20-00-0
HT-29(結(jié)腸癌細胞) 5×106cells/瓶×25-胞嘧啶核苷二嶙酸二鈉鹽,英文名或英文縮寫:5′-CDP,2Na,級別:BR,99%,規(guī)格:1克
Gibco 17105041 Dispase II, powder 5 g硅標準溶液Silicon
SW 1990(胰腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 NCL-H460(非小細胞肺癌)谷酰胺測試盒shēng huà shì jì容量:RT100塊/箱
CM-M122小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞*培養(yǎng)基100mLD-半胱酸 D-Cysteine,≥99% 921-01-7 500MG 通用試劑
5E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD73 / 5E 細胞裂解液 (陽性對照) 咪坐;;;間二氮茂;1,3-二氮雜茂 IMidczolq;IMinczolq;1,3-Diczc-2,4-cyclopqntcdiqnq;Pyrro[b]Monczolq;Miczolq; 1988/3/4
間充質(zhì)干細胞軟骨細胞分化培養(yǎng)基MCDM-prf胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯10克RT
HeLa細胞,細胞 小鼠T細胞瘤細胞,Cyc-Tag(S49)細胞 原代平滑肌細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml22739-76-0氘代異-D82-PROPANOL-D8
自噬相關(guān)蛋白8A抗體說明侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細胞;C918馬來酸氟吡汀Flupirtine maleate質(zhì)量規(guī)格:>98%
HuH-7細胞,肝癌細胞 小鼠樣瘤細胞,P388D1細胞 小型豬腎細胞;MPK馬來酸氟吡汀(標準品)Flupirtine maleate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
MDA-MB-435S(導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2氟維司群Fulvestrant質(zhì)量規(guī)格:>99%,進分,ER(雌激素受體)拮抗劑
Promocell C-22121 Endothelial Cell GrowthMedium MV 2 KIT, 內(nèi)皮細胞生長培養(yǎng)基MV2套裝 500ml孕二1酮Gestodene質(zhì)量規(guī)格:>99%
雪旺細胞HSC孕二1酮(標準品)Gestodene質(zhì)量規(guī)格:>99%,標準品
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。