標(biāo)記抗體的原理:
目前較為常用的標(biāo)記抗體的方法,FITC一般呈黃色、褐色或褐黃色粉末或結(jié)晶,性質(zhì)穩(wěn)定在低溫中能保存數(shù)年。在堿性條件下,FITC的碳酰胺鍵可與抗體蛋白上的賴氨酸氨基共價結(jié)合,形成FITC-蛋白質(zhì)結(jié)合物,即熒光抗體或熒光結(jié)合物。一個抗體分子上最多能標(biāo)記15~20個FITC分子,被標(biāo)記的抗體仍能保持與相應(yīng)抗原結(jié)合的能力,在熒光燈源紫外線或藍紫光激發(fā)下產(chǎn)生黃綠色熒光,通過熒光顯微鏡進行觀察或利用流式細胞儀分析,從而對抗原進行定性、定位或定量。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 細胞分裂周期蛋白5抗體直銷 |
英文名稱 | APC5 |
貨號 | BJ-K96847 |
抗體的種類:
抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的,體液性抗體由B淋巴細胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對免疫球蛋白G、A、M、E了解較多,對D的功能了解較少。
(1) IgG:是血清中濃度的一類球蛋白,約占免疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血漿。機體受到抗原初次刺激后,其產(chǎn)生時間僅次于IgM。在抗體介導(dǎo)的抗感染免疫中起主要作用。IgG是球蛋白單體,分子量16萬~18萬,可以通過兔的胎盤,但不能通過豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗細菌、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。
(2) IgM:由5個球蛋白單位組成的五聚體,在血清中的含量僅次于IgG,分子量90萬,是體內(nèi)的球蛋白??乖醮未碳C體后,IgM出現(xiàn)最早,在血清中的含量僅次于IgG,主要分布在血管內(nèi),可以通過激活補體發(fā)揮溶菌、溶細胞及中和病毒的作用。因其是五聚體,免疫作用很強,是IgG的100倍,但由于含量僅為IgG的1/10,且持續(xù)時間短,所以在抗感染免疫中不能起主要作用。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與凝集反應(yīng)和補體結(jié)合反應(yīng)。
(3) IgA:有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中,分子量約為17萬,亦稱為血清型IgA,有抗菌和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中,如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液,以初乳中的含量。雙體IgA亦稱為分泌型IgA,由存在于粘膜和組織上的漿細胞產(chǎn)生,分子量40萬,含量較單體高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止細菌或病毒吸附于粘膜表面。
(4) IgE:是一種特殊的糖蛋白,為單位體結(jié)構(gòu),分子量19萬,由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部淋巴結(jié)中的漿細胞所形成,在血清中含量甚微,是一種致敏抗體,容易吸附在細菌表面,當(dāng)與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過敏反應(yīng)。在機體抵抗細菌和病毒的感染中幾乎無作用。多克隆抗體制備過程:
蛋白抗原
↘抗原準(zhǔn)備→兔、小鼠免疫→抗血清→抗體純化 →鑒定(ELISA、WB、IHC)
多肽偶聯(lián) ↗ (抗原親和純化)
從細胞中提取出來的生物大分子是不純凈的,必須進一步分離純化才能獲得純品。在生物大分子制備工作中,分離純化是比較復(fù)雜和重要的一個環(huán)節(jié)。對于異類的物質(zhì),如提純蛋白質(zhì)和酶時混雜著核酸,提純核酸時混雜著蛋白質(zhì)或多糖,一般可用專一性酶水解、有機溶劑抽提、選擇性分部沉淀等方法處理,小分子物質(zhì)常在整個制備過程中多次液相與固相互相轉(zhuǎn)化被分離或用透析方法除去。而對同類物質(zhì),如酶和雜蛋白,RNA和DNA以及不同結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)、酶、核酸之間的分離,情況則復(fù)雜得多,主要應(yīng)用的方法有電泳法、超速離心法、鹽析法、有機溶劑沉淀法、吸附法、結(jié)晶法、電點沉淀法、柱層析法
抗原抗體反應(yīng)影響因素:
(一)反應(yīng)物自身的因素
5) 抗體:不同來源的抗體,反應(yīng)性各有差異,抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應(yīng),為提高試驗的可靠性,應(yīng)選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑.等價帶的寬窄也影響抗原抗體復(fù)合物的形成,單克隆抗體不適用于沉淀反應(yīng).
6) 抗原:抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數(shù)目均可影響反應(yīng)結(jié)果.顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應(yīng),可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應(yīng),單價抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象.
(二)反應(yīng)環(huán)境條件
7) 酸堿度:抗原抗體反應(yīng)必須在合適的pH環(huán)境中進行.蛋白質(zhì)具有兩性電離性質(zhì),因此每種蛋白質(zhì)都有固定的等電點.抗原抗體反應(yīng)一般在pH6~9進行,有補體參與的反應(yīng)pH為7.7.4,pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應(yīng).
8) 溫度:在一定范圍內(nèi),溫度升高可加速分子運動,抗原與抗體碰撞機會增多,使反應(yīng)加速.一般為15℃~40℃,常用的抗原抗體反應(yīng)溫度為37℃,溫度如高于56℃,可導(dǎo)致已結(jié)合的抗原抗體再解離,甚至變性或破壞.每種試驗都有其*的最適反應(yīng)溫度要求.此外,適當(dāng)振蕩也可促進抗原抗體分子的接觸,加速反應(yīng).
9) 電解質(zhì):抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合后,雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體,若溶液中無電解質(zhì)參加,仍不出現(xiàn)可見反應(yīng).為了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液
EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白聚(丁二酸)酯50克RT
AM(腺樣囊性癌細胞(高轉(zhuǎn)移)) 5×106cells/瓶×2 綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細胞;MFC-GFP軟骨速酶 (-20℃) CHONDROITINcSq cBC 904-13-9
表皮色素細胞-中色素總RNAHEM-m NAL-蘋果酸 L-(-)-Malic acid (95-1for cell cu... 97-67-6 25G 通用試劑
SERPINB4 Others Human SerpinB4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 肝素抗凝管支RT
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21(小牛胸腺DNA)
犬腎細胞;MDCK/IgR BALB/C小鼠胚成纖維細胞,BALB/3T3細胞 RYTF細胞,兔眼Tenon's囊成纖維細胞化亞甲基,英文名或英文縮寫:MDN,級別:CP,98%,規(guī)格:10克
細胞;13012-安基異丁醋;DL-2-安基異丁醋;2-安基異酪醋;DL-2-基炳安醋;DL-2-安基-2-基炳醋 2-cMinoisobutyric ccid;DL-2-cMinoisobutcnoic ccid;DL-2-cMinoisobutyric ccid;DL-2-Mqthylclcninq;DL-2-cMino-2-Mqthyl propcnoic ccid 6-27-7
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) 3-硝基本酚,英文名或英文縮寫:3-nitnopxenol,級別:BR,98%,規(guī)格:5克
HET-1A, 食管上皮細胞2-基,英文名或英文縮寫:2-VP,級別:4N,規(guī)格:25克
NA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Thailand/1(KAN-1)/2004) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 細胞裂解液 (陽性對照) 39968-33-71-羥基-7-氮雜本并三氮唑 (HOAt)(2-8℃)1-xy7noxy-7-azabenzotriazole
細胞分裂周期蛋白5抗體直銷腎小管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)(標(biāo)準(zhǔn)品)Diclofenac 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品
IL18RAP Others Mouse 小鼠 IL18RAP / IL1R7 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) Gabapentin質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,USP30
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-C4(標(biāo)準(zhǔn)品)Gabapentin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36 細胞,C127細胞 J774A.1細胞,鼠腹水單核細胞瘤Domperidone質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP5.0
胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38](標(biāo)準(zhǔn)品)Domperidone質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品