生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長(zhǎng)時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來(lái),此操作非常繁瑣,并且病毒在此過(guò)程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。
中文名稱:SDS-PAGE凝膠制備試劑盒
英文名稱:SDS-PAGE Gel Kit
產(chǎn)品規(guī)格:25T|50T
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-F0165162
產(chǎn)品介紹:
本公司的SDS-PAGE凝膠制備試劑盒是按照經(jīng)典方法配制而成。本試劑盒提供了配制SDS-PAGE凝膠所需的各種試劑,用戶只需自備制膠器具和蒸餾水,即可配制PAGE膠。本試劑盒可配制不同規(guī)格、不同聚合度的PAGE膠(即聚丙烯酰胺凝膠) 約25/50塊。 注意事項(xiàng): 1. TEMED和10%過(guò)硫酸銨后加,在加入前需混勻前面所加試劑。10%過(guò)硫酸銨溶液在4℃有效期為一周;TEMED易揮發(fā),使用后請(qǐng)蓋緊瓶蓋。在常溫下膠30分鐘內(nèi)可以凝固,如溫度過(guò)低,可放37℃溫箱凝固。灌完分離膠后,輕輕的加1mL ddH2O封上層,膠凝固后可見(jiàn)到分界線。灌濃縮膠前,先傾去水層,再用吸水紙吸干。濃縮膠灌好后立刻插入梳子。濃縮膠凝固后,放入電泳液中(讓電泳液漫過(guò)加樣孔),輕輕的撥出梳子,可防加樣孔變形。 2. 配制量可按上表等比加減。如果所用膠濃度與上面不同,可自行調(diào)整,主要是調(diào)整30%丙烯酰胺的量(需要濃度×總體積/30%),后用水補(bǔ)足總體積。 配膠說(shuō)明: 1. 先在過(guò)硫酸銨干粉中加入蒸餾水或去離子水(每克過(guò)硫酸銨需加水10mL)配置成10%溶液,將溶液分裝成小體積后凍存于-20℃,制備凝膠時(shí)融化后使用。4℃保存有效期7-30天。 2. 檢測(cè)SDS溶液是否澄清,若出現(xiàn)絮狀物或沉淀可放37℃片刻至溶解,不影響效果。 3. 根據(jù)目標(biāo)蛋白分子量大小,選取凝膠濃度,按下表配制。先配分離膠,再配濃縮膠。 儲(chǔ)存條件:RT |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無(wú)-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長(zhǎng)期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
細(xì)胞HISTONE H3蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒
載玻片細(xì)胞HISTONE H3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
冰凍切片組織HISTONE H3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
石蠟切片組織HISTONE H3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
載玻片細(xì)胞HISTONE H3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
小鼠血小板生長(zhǎng)因子(PDGF)elisa ,英文名: PDGF ELISA Kit
小鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA檢測(cè)試劑盒MousevisfatinELISAKit 96T/48T
人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF1A)免疫試劑盒 Human somal cell-derived factor 1 alpha,SDF1A ELISA kit
RatCalretinin,CRELISAKit大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)elisa規(guī)格:96T/48T
10%itonX-114溶液100毫升
MouseCA724elisa小鼠標(biāo)志物(CA724)elisa規(guī)格:96T/48T
SDS-PAGE凝膠制備試劑盒小鼠微粒體S轉(zhuǎn)移酶1(MGST1)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠微粒體甘油三酸酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(MTTP)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠微精蛋白β(MSMβ)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)elisa分析檢測(cè)試劑盒
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。