下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息：
產(chǎn)品名稱 | A9細(xì)胞，小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞規(guī)格 |
英文名稱 | A9 cells, mice subcutaneous connective tissue cells |
貨號(hào) | EY-X64156 |
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
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培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
丁酸梭菌 Clostridium butylicumEBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞
白蛋白(ALB)天然蛋白 Native Albumin (ALB)
禽膽鹽/Bile salt from poultryBR25克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞（未分化）苜蓿中華根瘤菌
圣堡羅沙門氏菌 Salmonella saintpaul人腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基
人肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大豆慢生根瘤菌
四硫磺酸鈉煌綠增菌液 規(guī)格： 2X5支 用途： 含液2ml/支和煌綠1ml/支，2支添加于100mL（023030）中配成TTB
AC肉湯/通用培養(yǎng)肉湯/AC Broth用于常見微生物增菌培養(yǎng)和不含防腐劑樣品的無(wú)菌試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
A9細(xì)胞，小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞規(guī)格克侖特羅偶聯(lián)牛血清白蛋白Clenbuterol/BSA 1mg
克侖特羅偶聯(lián)血藍(lán)蛋白Clenbuterol/KLH 1mg
畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗原(表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)肽)N端CRIPTO 0.5mg
細(xì)胞角蛋白19多肽抗原Cytokeratin 19 0.5mg
人癌胚抗原抗原CEA(Carcinoembryonic Antigen )peptide 0.5mg
半胱胺酸蛋白酶蛋白-6（抗原）Caspase-6 (NT) 0.5mg
CD105/轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體抗原CD105 0.5mg
CD339/Jagged1抗原CD339/Jagged1 0.5mg
即刻早期基因(一種原癌基因)抗原C-fos 0.5mg
CD3 epsilon(抗原)CD3 epsilon 0.5mg
偶聯(lián)牛血清白蛋白chloramphenicol/BSA 2mg
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
