貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
LX2800 | Phalloidin 鬼筆環(huán)肽 | 1MG | 5290 |
LX2820 | Phalloidin 鬼筆環(huán)肽 | 5MG | 17689 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
鬼筆環(huán)肽Phalloidin標(biāo)記探針會(huì)選擇性地結(jié)合F-肌動(dòng)蛋白。以納摩爾濃度使用,鬼筆環(huán)肽衍生物是方便的探針,用于標(biāo)記,鑒定和定量甲醛固定和透化組織切片中的F-肌動(dòng)蛋白,細(xì)胞培養(yǎng)物或無(wú)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。肌動(dòng)蛋白是一種球狀的,大約42kDa的蛋白質(zhì),幾乎存在于所有真核細(xì)胞中。 它也是zuigao度保守的蛋白質(zhì)之一,與藻類和人類不同的物種相差不超過(guò)20%。 肌動(dòng)蛋白是細(xì)胞中兩種細(xì)絲的單體亞基:微絲,細(xì)胞骨架的三個(gè)主要組分之一,以及微絲,是肌細(xì)胞中收縮裝置的一部分。 因此,肌動(dòng)蛋白參與許多重要的細(xì)胞過(guò)程,包括肌肉收縮,細(xì)胞運(yùn)動(dòng),細(xì)胞分裂和胞質(zhì)分裂,囊泡和細(xì)胞器運(yùn)動(dòng),細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo),以及細(xì)胞連接和細(xì)胞形狀的建立和維持。
鬼筆環(huán)肽比肌動(dòng)蛋白單體更緊密地結(jié)合肌動(dòng)蛋白絲,導(dǎo)致肌動(dòng)蛋白亞基從絲狀末端解離的速率常數(shù)降低,基本上通過(guò)防止絲解聚來(lái)穩(wěn)定肌動(dòng)蛋白絲。此外,發(fā)現(xiàn)鬼筆環(huán)肽抑制F-肌動(dòng)蛋白的ATP水解活性。鬼筆環(huán)肽在細(xì)胞中以不同濃度起作用不同。當(dāng)以低濃度引入細(xì)胞質(zhì)時(shí),鬼筆環(huán)肽將較少聚合形式的細(xì)胞質(zhì)肌動(dòng)蛋白以及微絲蛋白聚集成聚集的肌動(dòng)蛋白聚合物的穩(wěn)定“島”,但它不會(huì)干擾應(yīng)力纖維,即厚的微絲束。鬼筆環(huán)肽的性質(zhì)是通過(guò)用熒光類似物標(biāo)記鬼筆環(huán)肽并用它們?nèi)旧?dòng)蛋白絲用于光學(xué)顯微鏡來(lái)研究F-肌動(dòng)蛋白在細(xì)胞中的分布的有用工具。鬼筆環(huán)肽的熒光衍生物已經(jīng)證明在定位活細(xì)胞或固定細(xì)胞中的肌動(dòng)蛋白絲以及在體外可視化單個(gè)肌動(dòng)蛋白絲方面非常有用。熒光鬼筆環(huán)肽衍生物已被用作高分辨率肌動(dòng)蛋白研究中的重要工具。
產(chǎn)品性質(zhì)
分子式(Formula):C35H48N8O11S
分子量(Molecular Weight):788.87
外觀(Appearance):白色凍干粉末
純度(Purity):≥96%
溶解性(Solubility):DMSO
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存。
注意事項(xiàng)
1)鬼筆環(huán)肽具有毒性,需小心操作(對(duì)人的半數(shù)致死劑量LD50約2mg/kg)。
2)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作步驟
1.制備1000 X鬼筆環(huán)肽DMSO儲(chǔ)備液:將30μLDMSO加入粉末形式的小瓶中。
2.制備1X鬼筆環(huán)肽結(jié)合物工作溶液:加入1μL1000X鬼筆環(huán)肽結(jié)合物DMSO溶液至1 mL含1%BSA的PBS。
注意1:鬼筆環(huán)肽結(jié)合物的未使用的1000X DMSO儲(chǔ)備溶液應(yīng)等分并儲(chǔ)存在-20℃,避光。
注意2:不同的細(xì)胞類型可能染色不同。 應(yīng)相應(yīng)地制備鬼筆環(huán)肽結(jié)合物工作溶液的濃度。
3.染色細(xì)胞:
3.1執(zhí)行甲醛固定。 在室溫下將含3.0-4.0%甲醛的細(xì)胞在PBS中孵育10-30分鐘。
注意:避免使用任何含甲醇的固定劑,因?yàn)榧状紩?huì)在固定過(guò)程中破壞肌動(dòng)蛋白。 優(yōu)選的固定劑是不含甲醇的甲醛。
3.2用PBS沖洗固定的細(xì)胞2-3次。
3.3可選:在PBS中加入0.1%Triton X-100固定細(xì)胞(步驟2.2)3至5分鐘,以增加滲透性。 用PBS沖洗細(xì)胞2-3次。
3.4將100μL/孔(96孔板)鬼筆環(huán)肽綴合物工作溶液(來(lái)自步驟1)加入固定的細(xì)胞(來(lái)自步驟2.2或2.3),并在室溫下染色細(xì)胞20至90分鐘
3.5在加上蓋玻片之前,用PBS輕輕沖洗細(xì)胞2至3次以除去過(guò)量的鬼筆環(huán)肽結(jié)合物,然后在顯微鏡下進(jìn)行,密封和成像。
相關(guān)產(chǎn)品:
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存 |
LX1801 | iFluor™ 488 phalloidin iFluor™ 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色) | 300T | -20°C |
LX2801 | iFluor™ 555 phalloidin iFluor™ 555標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(橘色) | 300T | -20°C |
S5416 | DiI (DiIC18(3)) 細(xì)胞膜橙紅色熒光探針 | 10mg | -20°C |
S5418 | DiIC16(3) perchlorate 細(xì)胞膜橙紅色熒光探針 | 25mg | -20°C |
s5422 | DiR Iodide (DiIC18(7)) 細(xì)胞膜深紅色熒光探針 | 25mg | -20°C |
S3804 | CDCFDA, SE (細(xì)胞增殖示蹤熒光探針) | 25mg | -20°C |