JC-1 線粒體膜電位熒光探針
溫馨提示:見我司整理線粒體熒光探針產(chǎn)品專題。
產(chǎn)品標(biāo)簽
Rhodamine 123 羅丹明123;JC-1;JC-10;CCCP;CAS:62669-70-9
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | CAS NO. | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
JC-1 (Powder) 線粒體膜電位熒光探針 | MX3203-1MG | 3520-43-2 | 1mg | 588 |
JC-1 (Powder) 線粒體膜電位熒光探針 | MX3203-5MG | 3520-43-2 | 5mg | 1918 |
JC-1 (Powder) 線粒體膜電位熒光探針 | MX3203-25MG | 3520-43-2 | 25mg | 7288 |
【溫馨提示1】:我司懋康生物提供JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒(MX3204-100T),含實(shí)驗(yàn)所需的緩沖液和陽性對照,使用更方便,結(jié)果更直觀。
【溫馨提示2】:我司懋康生物提供JC-1的升級產(chǎn)品JC-10(MX3206-1MG,MX3207-100T),后者具有更好的水溶性,能更好的加載進(jìn)入細(xì)胞,結(jié)果更準(zhǔn)確。
產(chǎn)品描述
JC-1 是一種廣泛用于檢測線粒體膜電△Ψm位的理想熒光探針。JC-1染料以電勢依賴性的方式積聚在線粒體內(nèi),可以用來檢測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內(nèi),JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物,聚合物發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失,JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中,產(chǎn)生綠色熒光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。JC-1不僅可用于定性檢測,因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測,因線粒體的去極化程度可以通過紅/綠熒光強(qiáng)度的比例來衡量。觀察時(shí),只需使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設(shè)置即可。
本品以凍干粉形式提供,CAS NO. 3520-43-2 ,細(xì)胞培養(yǎng)級。用于檢測細(xì)胞的線粒體膜電位時(shí)常用的濃度范圍為1~20 µg/ml,對于很多細(xì)胞適宜采用的工作濃度為10 µg/ml。
產(chǎn)品特性
1) CAS NO:3520-43-2
2) 化學(xué)名:5,5‘,6,6’-Tetrachloro-1,1‘,3,3’-tetraethylbenzimidazolylcarbocyanine iodide
3) 分子式:C25H27Cl4IN4
4) 分子量:652.23 g/mol
5) 純度:>95%(HPLC)
6) 外觀:紅褐色粉末
7) 溶解性:溶于DMSO、DMF,幾乎不溶于水
8) Ex/Em:單體形式(monomer form):Ex=514 nm, Em=529 nm;
聚合物形式(J-aggregate form):Ex=585 nm, Em=590 nm;
注意事項(xiàng)
JC-1是光敏感性的,所有染色步驟的操作過程中避免強(qiáng)光接觸。
JC-1染色完成后,立即進(jìn)行后續(xù)的結(jié)果分析非常必要;
3) 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 染色工作液制備
1) JC-1儲存液制備:將JC-1粉末室溫回溫20min左右,直接加1ml 無水DMSO到5mg粉末,顛倒混勻
使其充分溶解后,即得到5mg/ml的儲存液。溶液單次用量分裝存于-20℃,避光干燥且避免反復(fù)凍融。
JC-1工作液制備:將凍存的儲存液置于室溫充分融化,之后用緩沖液或者預(yù)熱的培養(yǎng)基直接稀釋儲存液(5 mg/ml)到需要的工作濃度,邊震蕩邊稀釋,充分混勻。為了去除任何不溶顆粒,建議13,000 x g離心工作液1 min,小心吸取上清轉(zhuǎn)移到新的管子內(nèi)。整個(gè)過程要避光操作。
【注意】:因JC-1不溶于水,很可能在稀釋到工作液的過程中形成聚集顆粒,建議細(xì)胞染色前用離心或者過濾的方法去除這些顆粒后再使用。
JC-1染色步驟(流式細(xì)胞儀)
數(shù)據(jù)分析:
含有紅色JC-1聚集物的健康細(xì)胞線粒體用FL2通道檢測;含有綠色JC-1單體的凋亡或不健康細(xì)胞用FL1(FITC)通道檢測。
JC-1染色步驟(熒光顯微鏡)
A. 懸浮細(xì)胞
B. 貼壁細(xì)胞
JC-1染色步驟(熒光酶標(biāo)儀)
1) -7)同上JC-1染色步驟(流式細(xì)胞儀);
8) 用0.3 ml緩沖液重懸細(xì)胞;然后按照每孔0.1 ml的量將染色好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到黑色的96孔板內(nèi),即可進(jìn)行熒光酶標(biāo)板分析。【注意】:請馬上進(jìn)行熒光顯微分析,此細(xì)節(jié)重要。
數(shù)據(jù)分析:
健康細(xì)胞,JC-1單體聚集形成聚合物,線粒體呈現(xiàn)強(qiáng)烈的紅色熒光(激發(fā)波長550 nm,發(fā)射波長600 nm)。而凋亡或壞死細(xì)胞內(nèi)JC-1以單體形式存在,線粒體呈強(qiáng)烈的綠色熒光(激發(fā)波長485 nm, 發(fā)射波長535nm)。之后計(jì)算紅色熒光信號與綠色熒光信號的比值,用來判斷細(xì)胞健康程度。
相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
MX3203-1MG | JC-1 (Powder) 線粒體膜電位熒光探針(粉末) | 1mg |
MX3204-100T | JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit | 100T |
MX3206-1MG | JC-10 for Mitochondrial Membrane Potential | 1mg |
MX3207-100T | JC-10 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit | 100T |
MX3208-5MG | Rhodamine 123 羅丹明123(線粒體膜電位熒光探針) | 5mg |
MX3209-100T | Rhodamine 123 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit | 100T |
MX3210-50T | Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit | 50T |
MX3212-50T | Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit | 50T |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
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JC-1 線粒體膜電位熒光探針 細(xì)胞增值
JC-1 線粒體膜電位熒光探針 細(xì)胞增值