商品介紹:
溴化乙啶(Ethidium Bromide EB)是一種DNA 結(jié)合性熒光色素,其激發(fā)波長(zhǎng)510nm。發(fā)射波長(zhǎng)595nm。產(chǎn)生桔紅色熒光。
商品屬性:
貨號(hào) | 規(guī)格 | 貨期 | 英文名稱 |
CS-C6411 | 100T | 1~3天 | Cell Apoptosis Ethidium Bromide Detection Kit |
EB 不具有膜通透性,不能透過(guò)活細(xì)胞膜,只能染死細(xì)胞,因此用EB 單染時(shí),正常細(xì)胞不著色,早期凋亡細(xì)胞呈微弱桔紅光,晚期凋亡細(xì)胞桔紅色熒光增強(qiáng)。死細(xì)胞呈強(qiáng)桔紅光。EB 常與橙合用雙染進(jìn)行凋亡檢測(cè),與橙雙染時(shí),正常細(xì)胞中EB 不能透膜著色,而橙可透過(guò)細(xì)胞膜,使細(xì)胞呈綠色均勻熒光,細(xì)胞圓形均勻;而在凋亡細(xì)胞中,細(xì)胞皺縮、染色質(zhì)凝聚、固縮或斷裂,出芽,凋亡小體形成。染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色顆粒;而壞死細(xì)胞被EB 染成桔紅色,由此熒光顏色和細(xì)胞形態(tài)可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞。
儲(chǔ)存:2-8℃,避光,有效期12個(gè)月。
步驟和注意事項(xiàng):?
準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)環(huán)境:?確保實(shí)驗(yàn)區(qū)域清潔,?使用酒精清潔計(jì)數(shù)板和蓋玻片,?然后用吸水紙輕輕擦干。?
細(xì)胞培養(yǎng):?
準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?
取出保存于低溫下的細(xì)胞苗,?并加入培養(yǎng)基中,?搖晃混合均勻。?
用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?
將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中,?定期更換培養(yǎng)液。?
細(xì)胞凍存與復(fù)蘇:?
細(xì)胞系的凍存是將生長(zhǎng)較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中,?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度,?并在此溫度下對(duì)其長(zhǎng)期保存的過(guò)程。?
復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過(guò)程,?原則是“慢凍快融”,?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?
細(xì)胞計(jì)數(shù):?
制備細(xì)胞懸液,?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,?制成單個(gè)細(xì)胞懸液。?
在顯微鏡下,?用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù),?細(xì)胞壓中線時(shí),?只計(jì)左側(cè)和上方者,?不計(jì)右側(cè)和下方者。?
熒光顯微鏡使用:?
使用熒光染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色,?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號(hào),?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?
聚合酶鏈反應(yīng)(?PCR)?:?
準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?
按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?
在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液,?開(kāi)始PCR反應(yīng)。?
PCR反應(yīng)的成功與否,?可以通過(guò)電泳、?測(cè)序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?
轉(zhuǎn)染:?
準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?
制備轉(zhuǎn)染試劑,?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中,?與細(xì)胞混合均勻。?
處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞,?并進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。?
在操作過(guò)程中,?應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范,?避免隨意丟棄垃圾,?及時(shí)登記購(gòu)買耗材或試劑,?保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔和安全
下列是公司正在出售的產(chǎn)品:
番紅O染色液(0.5%) | 防御β116(DEFβ116)ELISA試劑盒 |
IGF-1R和IR抑制劑(GSK1904529A) | 防御β115(DEFβ115)ELISA試劑盒 |
Pim激酶抑制劑(GDC-0339) | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移9(GALNT9)ELISA試劑盒 |
CerK抑制劑(NVP 231) | 防御β113(DEFβ113)ELISA試劑盒 |
B-Raf抑制劑(SB-590885) | 防御β112(DEFβ112)ELISA試劑盒 |
EGFR抑制劑(AV-412) | 防御β11(DEFβ11)ELISA試劑盒 |
EGFR抑制劑(PD153035 Hydrochloride) | 毒蕈堿型受體M4(CHRM4)ELISA試劑盒 |
細(xì)胞分裂抑制劑(DM4) | 防御β13A(DEFβ13A)ELISA試劑盒 |
GDH1抑制劑(R162) | 蛋白酪氨磷受體R(PTPRR)ELISA試劑盒 |
IDO抑制劑(IDO-IN-3) | 防御α6(DEFα6)ELISA試劑盒 |
MAPK/NF-κB信號(hào)通路抑制劑(Scutellarin) | 蛋白二硫化物異構(gòu)A5(PDIA5)ELISA試劑盒 |
Raf激酶和EGFR抑制劑(BGB-283) | 防御α3(DEFα3)ELISA試劑盒 |
醌氧化還原酶1(NQO1)和PDK1抑制劑(Dicoumarol) | 防御α1(DEFα1)ELISA試劑盒 |
c-Met信號(hào)通路抑制劑(c-Met inhibitor 1) | 溴化乙錠EB染色試劑盒細(xì)胞組織染色垂體腺苷環(huán)化激活肽(ADCYAP1)ELISA試劑盒 |
ALK抑制劑(CEP-28122 mesylate salt) | 層粘連蛋白β2(LAMβ2)ELISA試劑盒 |