商品介紹:
本試劑盒為動物細胞死活檢測提供了雙色熒光染色方法。本試劑盒采用兩種廣泛常用的熒光探針,通過檢測細胞內(nèi)酯酶活性和質(zhì)膜完整性兩個方面反映細胞活力。本試劑盒適用于熒光顯微鏡、熒光多孔板、掃描儀、流式細胞儀以及其他熒光檢測系統(tǒng)。本試劑盒可以應(yīng)用于大多數(shù)的真核哺乳動物細胞,包括貼壁細胞核某些組織,但不適用與細菌、酵母。該方法更快捷安全且靈敏度更高。
商品屬性:
貨號 | 規(guī)格 | 貨期 | 英文名稱 |
CS-C6108 | 1000T | 1~3天 | Live & Dead Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Cells |
原理:在鈣黃素AM 存在活細胞內(nèi)時,其特點就是由于胞內(nèi)的酯酶活性作用,由幾乎無熒光、具有細胞膜透性的鈣黃素AM生成具有強烈熒光信號的綠色熒光物質(zhì)(Ex/Em:495nm/520nm)。而對于受損的細胞膜來說,碘化丙啶(PI)可以傳過進入細胞,與核酸結(jié)合,熒光信號從而放大40 倍,產(chǎn)生一個明亮的紅色熒光信號的死細胞(Ex/Em:530nm/620nm)。
步驟和注意事項:?
準備實驗環(huán)境:?確保實驗區(qū)域清潔,?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片,?然后用吸水紙輕輕擦干。?
細胞培養(yǎng):?
準備試管或培養(yǎng)皿、?細胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細胞。?
取出保存于低溫下的細胞苗,?并加入培養(yǎng)基中,?搖晃混合均勻。?
用移液管將細胞培養(yǎng)基和細胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?
將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中,?定期更換培養(yǎng)液。?
細胞凍存與復(fù)蘇:?
細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中,?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度,?并在此溫度下對其長期保存的過程。?
復(fù)蘇則是將凍存的細胞系恢復(fù)到常溫的過程,?原則是“慢凍快融”,?以較大限度地保存細胞活力。?
細胞計數(shù):?
制備細胞懸液,?使用消化單層培養(yǎng)細胞或收集懸浮培養(yǎng)細胞,?制成單個細胞懸液。?
在顯微鏡下,?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細胞數(shù),?細胞壓中線時,?只計左側(cè)和上方者,?不計右側(cè)和下方者。?
熒光顯微鏡使用:?
使用熒光染料對細胞進行染色,?并觀察細胞所發(fā)出的熒光信號,?以研究細胞結(jié)構(gòu)和功能。?
聚合酶鏈反應(yīng)(?PCR)?:?
準備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?
按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?
在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液,?開始PCR反應(yīng)。?
PCR反應(yīng)的成功與否,?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認。?
轉(zhuǎn)染:?
準備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細胞。?
制備轉(zhuǎn)染試劑,?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中,?與細胞混合均勻。?
處理轉(zhuǎn)染細胞,?并進行下一步實驗。?
在操作過程中,?應(yīng)注意實驗室安全規(guī)范,?避免隨意丟棄垃圾,?及時登記購買耗材或試劑,?保持實驗環(huán)境的清潔和安全
下列是公司正在出售的產(chǎn)品:
高保真KOD試劑盒 | ECF 人鼠嗜粒細胞趨化因子ELISA檢測試劑盒 |
hERG抑制劑(Daurisoline) | Eotaxin 1/CCL11 人嗜粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1ELISA檢測試劑盒 |
MEK抑制劑(Cobimetinib hemifumarate) | Hsp-6 雞熱休克蛋白6ELISA檢測試劑盒 |
cathepsin B抑制劑(CA-074) | EPO 人紅細胞生成ELISA檢測試劑盒 |
多靶點激酶抑制劑(AZD2932) | E-Selectin/CD62E 人E選擇ELISA檢測試劑盒 |
PIM抑制劑((1S,3R,5R)-PIM447 dihydrochloride) | FAS/CD95 人凋亡相關(guān)因子ELISA檢測試劑盒 |
Bcl-2抑制劑((S)-Gossypol acetic acid) | IL-6 綿羊白介6ELISA檢測試劑盒 |
RET激酶抑制劑(RET Kinase inhibitor 1) | ALCAM 人白細胞活化黏附因子ELISA檢測試劑盒 |
PI3K抑制劑(CAL-130 Hydrochloride) | TRAIL-R3 猴子腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3ELISA檢測試劑盒 |
I型激酶抑制劑(VI 16832) | ACE 人血管緊張轉(zhuǎn)化ELISA檢測試劑盒 |
PI3K抑制劑(PI3K-IN-1) | IFN-α 猴α干擾ELISA檢測試劑盒 |
LSD1抑制劑(GSK-LSD1 Dihydrochloride) | ANG 人血管生長ELISA檢測試劑盒 |
突變型EGFR抑制劑(Mutated EGFR-IN-1) | ANG-1 人血管生成1ELISA檢測試劑盒 |
Clk4抑制劑(ML167) | 細胞活力(活死細胞染色)檢測試劑盒細胞凋亡OxLDL 兔子氧化低密度脂蛋白ELISA檢測試劑盒 |
ULK1激動劑(LYN-1604 hydrochloride) | PEDF 兔色上皮衍生因子ELISA檢測試劑盒 |