細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
細(xì)胞生物學(xué)研究的常用技術(shù)有哪些:
1.顯微技術(shù):包括顯微觀察,顯微操作.
2細(xì)胞組分分析技術(shù):離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細(xì)胞化學(xué)分析技術(shù).
3.細(xì)胞工程:細(xì)胞培養(yǎng)。
Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒試劑盒組份:
Annexin V-FITC——————100μl
Annexin V-FITC結(jié)合液———12ml
碘化丙啶染色液——————220μl
Annexin是一類廣泛分布于真核細(xì)胞細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子依賴的磷脂結(jié)合蛋白,參與細(xì)胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。但僅Annexin V被報道可以調(diào)控一些PKC的活性。
Annexin V選擇性結(jié)合磷脂酰絲an酸(phosphatidylserine,簡稱PS)。磷脂酰絲an酸主要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè),即與細(xì)胞漿相鄰的一側(cè)。在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期,不同類型的細(xì)胞都會把磷脂酰絲an酸外翻到細(xì)胞表面,即細(xì)胞膜外側(cè)。磷脂酰絲an酸暴露到細(xì)胞表面后會促進(jìn)凝血和炎癥反應(yīng)。而Annexin V和外翻到細(xì)胞表面的磷脂酰絲an酸結(jié)合后可以阻斷磷脂酰絲an酸的促凝血和促炎癥反應(yīng)活性。
用帶有綠色熒光的熒光探針FITC標(biāo)記的Annexin V,即Annexin V-FITC,就可以用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡非常簡單而直接地檢測到磷脂酰絲an酸的外翻這一細(xì)胞凋亡的重要特征。
本試劑盒還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液,碘化丙啶可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,呈現(xiàn)紅色熒光。對于壞死細(xì)胞,由于細(xì)胞膜的完整性已經(jīng)喪失,Annexin V-FITC可以進(jìn)入到細(xì)胞漿內(nèi),與位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰絲an酸結(jié)合,從而也使壞死細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光。
本試劑盒的流式檢測效果參考圖1和圖2,熒光顯微鏡檢測效果參考圖3。
1.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡的效果圖。Jurkat細(xì)胞未經(jīng)處理(A)或用10μM(Camptothecin)作用4小時(B)后,用本試劑盒染色,然后用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞的散射和熒光檢測。從圖中可以看出,經(jīng)過凋亡誘導(dǎo)劑處理后的細(xì)胞,其Annexin V-FITC染色陽性并且PI染色陰性的細(xì)胞,即凋亡細(xì)胞,明顯增加(B圖的右下象限),Annexin V-FITC和PI染色雙陽性的細(xì)胞,即壞死細(xì)胞,也有所增加(B圖的右上象限)。圖中Annexin V-FITC染色陰性PI染色陽性(Annexin V-/PI+)所在象限(A和B圖的左上象限)出現(xiàn)的細(xì)胞點是許可范圍內(nèi)的檢測誤差。實測數(shù)據(jù)可能會因細(xì)胞類型、細(xì)胞凋亡情況、檢測儀器等的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
2.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測效果驗證圖。Jurkat細(xì)胞用10μM(Camptothecin)作用4小時后,未經(jīng)染色(A)、僅用本試劑盒中的PI進(jìn)行染色(B)、僅用本試劑盒中的Annexin V-FITC進(jìn)行染色(C)、用本試劑盒中的Annexin V-FITC和PI進(jìn)行雙染(D)。從圖中可以看出,未經(jīng)染色的是雙陰性細(xì)胞(A),僅PI染色后出現(xiàn)了預(yù)期的PI染色陽性的細(xì)胞,僅Annexin V-FITC染色出現(xiàn)了預(yù)期的Annexin V-FITC染色陽性的細(xì)胞,Annexin V-FITC和PI雙染出現(xiàn)了預(yù)期的僅Annexin V-FITC染色陽性的凋亡細(xì)胞和雙陽性的壞死細(xì)胞。出現(xiàn)的非預(yù)期的細(xì)胞點在許可的誤差范圍內(nèi)。實測數(shù)據(jù)可能會因細(xì)胞類型、細(xì)胞凋亡情況、檢測儀器等的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
儲存條件:4℃避光,有效期6個月。
產(chǎn)品名稱 | Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 | 貨號 | CS-C6016 |
英文名稱 | Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit | 規(guī)格 | 20次|50次 |
本試劑盒是用FITC標(biāo)記的重組人Annexin V來檢測細(xì)胞凋亡時出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷脂酰絲an酸的一種細(xì)胞凋亡檢測試劑盒??梢允褂昧魇郊?xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設(shè)備進(jìn)行檢測。一個包裝的本試劑盒共可以檢測20個細(xì)胞樣品。
注意事項:
1. 本試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶,反復(fù)凍融會導(dǎo)致其逐漸失活。盡管經(jīng)測試本試劑反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,為取得良好的使用效果,*次解凍后可適當(dāng)分裝保存。反復(fù)凍融過程中,可能會導(dǎo)致檢測試劑中出現(xiàn)少量沉淀,此時宜平衡至室溫,并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物,可以離心去除后使用,經(jīng)測試不會影響后續(xù)的檢測效果。
2. 檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相鄰孔之間會產(chǎn)生相互干擾。
3. 使用說明中提供了檢測ATP標(biāo)準(zhǔn)品的方法,實際檢測細(xì)胞活力時通常并不需要檢測ATP標(biāo)準(zhǔn)品。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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