細(xì)胞劃痕實驗服務(wù)原理
將細(xì)胞培養(yǎng),觀察細(xì)胞向無細(xì)胞的劃痕區(qū)域遷移情況,來判斷細(xì)胞的遷移能力
實驗服務(wù)目的
細(xì)胞劃痕法檢測細(xì)胞的遷移能力
實驗儀器
超凈工作臺、CO2培養(yǎng)箱、生物倒置顯微鏡、6孔板(其他的也可以,但感覺6孔比較好,大小適中)、
marker筆、直尺20、微升槍頭(滅菌)、無血清培養(yǎng)基、PBS
實驗準(zhǔn)備
所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min (超凈臺內(nèi))
實驗流程
1.先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻得劃橫線,大約每隔0.5~1cm- -道,橫穿過孔。每孔至少
穿過5條線。
2在空中加入約5X105個細(xì)胞,具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。
3.第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜。
4.用PBS洗細(xì)胞3次,去處劃下的細(xì)胞,加入無血清培養(yǎng)基。
5.放入37度5%CO2培養(yǎng)箱,培養(yǎng)。按0,6, 12, 24小時取樣,拍照。
細(xì)胞劃痕實驗服務(wù)內(nèi)容與方法
1、使用marker筆在6孔板背后,均勻得劃橫線,大約每隔0.5-1cm- 道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條
2、在孔中加入約5x105個細(xì)胞,具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。
3第二天用搶頭比著直尺,思量垂至于背后的捕線劃液,搶頭要垂直。
4、用PBS洗細(xì)胞3次, 去除劃下的細(xì)胞,加入無血清培養(yǎng)基。
5、放入37度5%c02培養(yǎng)箱,培養(yǎng)。按0,6,12, 24小時取樣,拍照。
細(xì)胞劃痕實驗服務(wù)信息(客戶提供)
生長狀態(tài)良好的細(xì)胞株,一并提供細(xì)胞特性, 培養(yǎng)條件及相關(guān)注意事項。