下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息:
產(chǎn)品名稱(chēng) | DU145細(xì)胞,前列腺癌細(xì)胞說(shuō)明書(shū) |
英文名稱(chēng) | DU145 cells, prostate cancer cells |
貨號(hào) | EY-X63210 |
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀(guān)察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀(guān)察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
ABCA1 英文名稱(chēng): 腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體 0.1ml
AKT2 英文名稱(chēng): 蛋白激酶B2 0.1ml
Angiopoietin 2 英文名稱(chēng): 血管生成素2抗體 0.1ml
Aromatase 英文名稱(chēng): 芳香化酶/細(xì)胞色素P450/雌激素合成酶抗體 0.1ml
Adenosine Receptor A2a 英文名稱(chēng): 腺苷A2A受體抗體 0.1ml
AKAP95 英文名稱(chēng): 蛋白激酶A錨定蛋白95抗體 0.1ml
ASBT 英文名稱(chēng): 頂膜鈉依賴(lài)性膽鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體 0.1ml
ADAM8 英文名稱(chēng): 去整合素樣金屬蛋白酶8抗體 0.2ml
AADACL3 英文名稱(chēng): 芳香乙酰胺脫乙?;笜拥鞍?抗體 0.2ml
ACN9 英文名稱(chēng): ACN9蛋白抗體 0.2ml
ADAR1 (N-terminus) 英文名稱(chēng): 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(N端) 0.2ml
AMPK alpha 2 英文名稱(chēng): 腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體 0.1ml
ADK 英文名稱(chēng): 腺苷酸激酶抗體 0.1ml
A2ML1 英文名稱(chēng): α2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1 0.1ml
3-Apr 英文名稱(chēng): 細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白3抗體 0.1ml
Actin 英文名稱(chēng): 肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體 0.1ml
小鼠腫瘤標(biāo)志物elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠心鈉肽elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠心鈉肽(ANP)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠毒性休克綜合征毒素1elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠對(duì)氨基苯甲酸elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠對(duì)氨基苯甲酸(PABA)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠T細(xì)胞活化連接蛋白elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠解脲脲原體抗體elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgMelisa檢測(cè)試劑盒 小鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠抗中性粒/中心體抗體elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠促黃體激素elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠促黃體激素(LH)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠絨毛膜elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠絨毛膜(CG)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠C肽elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠C肽(C-Peptide)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠胰島素elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠胰島素(INS)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠新生甲狀腺素elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠游離三碘甲狀腺原氨酸elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠游離甲狀腺素elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA檢測(cè)試劑盒
DU145細(xì)胞,前列腺癌細(xì)胞說(shuō)明書(shū)小鼠甲狀腺素elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠甲狀腺素(T4)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠三碘甲狀腺原氨酸elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠17羥孕酮elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。