抗體的鑒定：
1）抗體的效價鑒定：鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。
2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
3）真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
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英文名稱 Anti-phospho-Smad2 (Ser465)
中文名稱 磷酸化Smad2抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 58kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthetic phosphopeptide derived from human Smad2 around the Ser465
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:500-5000 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 phospho-Smad2(Ser465); p-Smad2(Ser465); phospho-Smad2(S465); Mothers against decapentaplegic homolog 2; SMAD 2; Mothers against DPP homolog 2; Smad2; hMAD 2; hSMAD2; JV18 1; JV18; JV181; MAD; MAD Related Protein 2; MADH2; MADR2; MGC22139; MGC34440; Mothers Against Decapentaplegic Homolog 2; mothers against DPP homolog 2; SMAD 2; SMAD; SMAD2; SMAD2_HUMAN.
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抗體制備過程：
1.材料與試劑
a．提取的動物 Ig
b．弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c．和
d．實(shí)驗(yàn)動物 兔
e．其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實(shí)驗(yàn)活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）
(S)-1-Boc-3-羥分子式：201.26英文名稱：(S) -1-Boc-3- hydroxy piperidine：143900-44-1分子量： C10H19NO3
1,1,1-三氟乙酰丙酮鐵分子式：515.09英文名稱：1,1,1- three.：28736-69-8分子量： C15H12F9FeO6
1-*咪唑分子式：310.39英文名稱：1- three phenyl methyl group：15469-97-3分子量： C22H18N2
1-乙-7-硝-1,2,3,4-四氫喹啉分子式：206.24英文名稱：1- ethyl -7- nitro -1,2,3,4- four：57883-28-0分子量： C11H14N2O2
4-羥-6-巰吡唑并[3,4-d]嘧分子式：168.18英文名稱：4- hydroxyl group -6- and [3,4-d]：24521-76-4分子量： C5H4N4OS
3-（1-嗪）-1，2-并異噻唑分子式：219.31英文名稱：3- (1- -1, 2- piperazine) benzisothiazole：87691-87-0分子量： C11H13N3S
α,α,α-三聯(lián)吡分子式：233.27英文名稱：Alpha, alpha, triple：1148-79-4分子量： C15H11N3
硫酸鉀分子式：174.26英文名稱：Potassium sulphate：7778-80-5分子量： K2SO4
2-噻唑啉分子式：102.16英文名稱：2- aminothiazoline：1779-81-3分子量： C3H6N2S
4-羰-四甲氧自由分子式：170.23英文名稱：4- - four methyl piperidine carbonyl oxygen free radical：2896-70-0分子量： C9H16NO2
2-氟-3-溴吡分子式：175.99英文名稱：2- -3- bromide：36178-05-9分子量： C5H3BrFN
磷酸化Smad2抗體KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞HEC-1-B(人內(nèi)膜腺細(xì)胞)
Neuro-2a/N2a(小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
檢定培養(yǎng)基/Nystatin Medium250克國產(chǎn)/進(jìn)口
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養(yǎng)基(配套靛基質(zhì))/MUG培養(yǎng)基/MUG-Medium（with Kovacs）大腸埃希氏菌快速熒光測定培養(yǎng)基20g+靛基質(zhì)20m國產(chǎn)/進(jìn)口
A673(人橫紋肌瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
RL95-2, 人內(nèi)膜腺細(xì)胞系
卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)/EYA培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Egg Yolk Agar Medium Base毒梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
CHL(倉鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
克氏鐵瓊脂斜面平板/KIA Plate10支國產(chǎn)/進(jìn)口
實(shí)驗(yàn)原理 :
（1）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞，通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。
（2）激活補(bǔ)體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。
（3）結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，參與免疫應(yīng)答。
（4）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
（6）抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
