抗體的鑒定:
1)抗體的效價(jià)鑒定:鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力。抗體的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
3)真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
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英文名稱 Anti-SPHK1
中文名稱 鞘氨醇激酶1抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/100μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 激酶和磷酸酶 細(xì)胞分化
蛋白分子量 predicted molecular weight: 42-52kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human SPHK1 C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 sphingosine kinase 1; SK 1; SK1; SPHK 1; SPHK; SPK; SPK 1; SPK1.
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抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.和
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
3-氟-2羥吡分子式:113.09英文名稱:3- -2 hydroxy pyridine:1547-29-1分子量: C5H4FNO
偶氮氯膦英文名稱:Azo chloride分子式: C16H11ClN2NaO11PS2·3分子量:85561-96-2:85561-96-2
6--1-甲-5(丙)尿嘧分子式:198.23英文名稱:6- -1- -5 (Bing Anji) amino methyl uracil:125092-42-4分子量: C8H14N4O2
2-乙喃分子式:96.13英文名稱:2- ethyl:3208-16-0分子量: C6H8O
2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二甲二鈉(BCA)英文名稱:2,2- two sodium benzoate (BCA), -4,4- two分子式:388.28分子量: C20H10N2Na2O4:979-88-4
*溴亞砜分子式:173.07英文名稱:Three methyl bromide:25596-24-1分子量: C3H9BrOS
1-芐-4-甲酰分子式:英文名稱:1- benzyl -4- benzoyl piperidine:分子量:
1-十六烷-4-甲氯吡鎓水合物分子式:354.02英文名稱:1- sixteen -4- alkyl methyl pyridinium chloride hydrate:13106-53-1分子量: C22H40ClN·xH2O
重鉻酸鉀分子式:294.18英文名稱:Potassium dichromate:7778-50-9分子量: K2Cr2O7
5--2,2-二氟-1,3-并二噁唑分子式:173.12英文名稱:5- -2,2- two -1,3- fluorine amino benzene and two oxazole:1544-85-0分子量: C7H5F2NO2
鉻黃英文名稱:Chrome yellow分子式:416.32分子量: C17H10N2Na2O6S:6054-97-3
鞘氨醇激酶1抗體NCI-H2170(人肺鱗細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
R 1610(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
褐球固氮菌 Bacillus thuringiensis subsp. kumamotoensis鏈霉菌 Streptomyces sp.
人直腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
氯化鎂孔雀綠增菌液(MM) 規(guī)格: 250g 用途: 用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
MCF-7(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腺細(xì)胞英文名稱:4T1
細(xì)胞毒性T-淋巴細(xì)胞關(guān)聯(lián)抗原4(CTLA4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cytotoxic T-Lymphocyte Associated Antigen 4 (CTLA4)
紫色直絲鏈霉菌 Streptomyces violaceorectus糙皮側(cè)耳 Pleurotus ostreatus
性別決定區(qū)Y框蛋白18(SOX18)重組蛋白英文名稱:Recombinant Sex Determining Region Y Box Protein 18 (SOX18)
親環(huán)素B(CYPB)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclophilin B (CYPB)
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)激活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。