實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)激活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
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英文名稱 Anti-Vitamin D Binding protein
中文名稱 維生素D結(jié)合蛋白抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 結(jié)合蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 51kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Vitamin D Binding protein
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 DBP; DBP/GC; GC; Gc globulin; GRD3; Group specific component; Group specific component vitamin D binding protein; hDBP; VDB; VDBG; VDBP; Vitamin D binding alpha globulin; VTDB_HUMAN.
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抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.和
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
抗體的鑒定:
1)抗體的效價(jià)鑒定:鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力。抗體的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
3)真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
鹽酸甲芐分子式:257.76英文名稱:Benzyl hydrochloride:366-70-1分子量: C12H20ClN3O
亮橙H英文名稱:Bright orange H分子式:378.38分子量: C18H15N2NaO4S:52749-23-2
鄰溴三氟甲分子式:225.01英文名稱:Ortho bromine three fluorine toluene:392-83-6分子量: C7H4BrF3
2,4,5-三氯甲分子式:195.47英文名稱:2,4,5- three:6639-30-1分子量: C7H5Cl3
對(duì)溴乙分子式:185.06英文名稱:Of bromine:1585-07-5分子量: C8H9Br
2--5-氯-3-甲吡分子式:142.59英文名稱:2- amino -5- -3-:20712-16-7分子量: C6H7ClN2
1-(3-丙)咪唑分子式:125.17英文名稱:1 -(3 -丙)咪唑:5036-48-6分子量: C6H11N3
氟氫鉀分子式:78.1英文名稱:Potassium fluoride:7789-29-9分子量: KHF2
2-氯-5-甲氧嘧分子式:144.56英文名稱:2- -5-, a:22536-65-8分子量: C5H5ClN2O
3-氟-4-硝甲分子式:155.13英文名稱:3- -4- nitro toluene:446-34-4分子量: C7H6FNO2
甘草英文名稱:Licorice acid分子式:822.93分子量:C42H62O16:1405-86-3
維生素D結(jié)合蛋白抗體植物桿菌 Lactobacillus plantarum釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
HuH-7(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
STO(小鼠胚成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基J774A.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞)
McCown Woody Plant MediumBR10升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
McCown Woody Plant MediumBR10升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
半蛋白酶抑制劑3(CST3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cystatin 3 (CST3)
美味側(cè)耳 Pleurotus sapidus嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus
Hanks’ Balanced Salt Solution規(guī)格:500ml
NCTC 1469(小鼠正常肝細(xì)胞)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum