抗體的鑒定:
1)抗體的效價(jià)鑒定:鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力??贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
3)真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
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英文名稱(chēng) Anti-phospho-VAV3(Tyr173)
中文名稱(chēng) 磷酸化核苷酸交換因子VAV3抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 G蛋白偶聯(lián)受體
蛋白分子量 predicted molecular weight: 98kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human VAV3 around the phosphorylation site of Tyr173
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 VAV3(phospho Y173); Guanine nucleotide exchange factor VAV3; Protein vav 3; Protein vav3; VAV 3; Vav 3 guanine nucleotide exchange factor; VAV 3 oncogene; VAV 3 protein; VAV-3; Vav3; VAV3 oncogene; VAV3 protein; VAV3_HUMAN.
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抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.和
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
四氫噻唑分子式:89.16英文名稱(chēng):Four hydrogen thiazole:504-78-9分子量: C3H7NS
α-硝萘分子式:173.16英文名稱(chēng):Nitro naphthalene:86-57-7分子量: C10H7NO2
釔鋇銅氧物分子式:458.68英文名稱(chēng):釔鋇銅氧物:107539-20-8分子量: BaCuO5Y2
4-N-BOC-分子式:200.28英文名稱(chēng):Aminopiperidine 4-N-BOC-:73874-95-0分子量: C10H20N2O2
2-溴吡分子式:158英文名稱(chēng):2- bromide:109-04-6分子量: C5H4BrN
敏樂(lè)分子式:209.25英文名稱(chēng):Min Yue:38304-91-5分子量: C9H15N5O
四甲酰分子式:144.09英文名稱(chēng):Tetra acyl hydrazine:52023-52-6分子量: C4H4N2O4
*砜分子式:106.14英文名稱(chēng):Three methyl group:5687-92-3分子量: C3H6O2S
2-糠硫吡分子式:191.24956英文名稱(chēng):2- bran sulfur based pyridine:分子量: C10H9NOS
異煙英文名稱(chēng):ISO nicotinic acid分子式:123.11分子量: C6H5NO2:55-22-1
知母提取物英文名稱(chēng):Rhizoma anemarrhenae extract分子式:分子量::
磷酸化核苷酸交換因子VAV3抗體小鼠睪間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱(chēng):MLTC-1
小鼠皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
UM-UC-3, 人膀胱移行細(xì)胞
野油菜黃單胞菌 Xanthomonas campestris串珠菌 Leuconostoc lactis
東方伊薩酵母 Issatchenkia orientalis黃質(zhì)產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces xanthochromogenes
人角膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
COLO 320(人結(jié)腸細(xì)胞)KATO III(人胃細(xì)胞)
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分)英文名稱(chēng):PC-12(未分)
甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1(MRC1)
纖溶酶原(Plg)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Plasminogen (Plg)
角蛋白18(KRT18)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Keratin 18 (KRT18)
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)激活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類(lèi)別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類(lèi)沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。