抗體的鑒定:
1)抗體的效價(jià)鑒定:鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力??贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
3)真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
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英文名稱 Anti-VAV3
中文名稱 核苷酸交換因子VAV3抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 G蛋白偶聯(lián)受體
蛋白分子量 predicted molecular weight: 97kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human VAV3
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 Guanine nucleotide exchange factor VAV3; Protein vav 3; Protein vav3; VAV 3; Vav 3 guanine nucleotide exchange factor; VAV 3 oncogene; VAV 3 protein; VAV-3; Vav3; VAV3 oncogene; VAV3 protein; VAV3_HUMAN.
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抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.和
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
2--1,3,4-噻二唑分子式:101.13英文名稱:2- -1,3,4- two:4005-51-0分子量: C2H3N3S
2--4-硝甲分子式:152.15英文名稱:2- amino -4- nitro toluene:99-55-8分子量: C7H8N2O2
5-亞硝-2,4,6-三嘧分子式:154.13英文名稱:5- nitroso -2,4,6- three aminopyrimidines:1006-23-1分子量: C4H6N6O
2,5-雙(4-二乙)-1,3,4-惡二唑分子式:364.49英文名稱:2,5- bis (4- two) -1,3,4- two:1679-98-7分子量: C22H28N4O
氟喹唑英文名稱:F, f分子式:376.17分子量: C16H8Cl2FN5O:136426-54-5
正丁氯鎂英文名稱:Butyl chloride分子式:116.87分子量: C4H9ClMg:693-04-9
2-氟分子式:126.13英文名稱:2- fluorine hydrazine:2368-80-1分子量: C6H7NO4S
4-氟-3-硝甲分子式:155.13英文名稱:4- -3- nitro toluene:446-11-7分子量: C7H6FNO2
1-[2-(二叔丁膦)]-3,5-二-1H-吡唑分子式:440.57英文名稱:1-[2- (DI Ding Jilin) phenyl phenyl pyrazole -1H-]-3,5- two:628333-86-8分子量: C29H33N2P
西英文名稱:Daphnoretin分子式:352.3分子量:C19H12O7:2034-69-7
(R)-1-Boc-3-羥分子式:201.26英文名稱:(R) -1-Boc-3- hydroxy piperidine:143900-43-0分子量: C10H19NO3
核苷酸交換因子VAV3抗體淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus弗吉尼亞鏈霉菌 Streptomyces virginiae
LLC(小鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H520(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica
BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
BC-020(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞雙孢蘑菇 Agaricus bisporus
人胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
苜蓿中華根瘤菌
VE(人血管內(nèi)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis赭曲霉 Aspergillus ochraceus
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)激活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。