抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
3)真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
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英文名稱 Anti-VGF/Nerve growth factor inducible
中文名稱 神經(jīng)生長因子誘導蛋白抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細胞生物 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導
蛋白分子量 predicted molecular weight: 65kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human VGF/Nerve growth factor inducible
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 NERP-1; NERP-2; Nerve growth factor inducible; Neuroendocrine regulatory peptide-2; Neurosecretory protein VGF; VGF; VGF_HUMAN.
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.和
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
甲磺酚妥拉明英文名稱:Phentolamine mesylate分子式:377.46分子量: C18H23N3O4S:65-28-1
草酸鈷分子式:177.02英文名稱:Cobalt oxalate:71-48-7分子量: C2H6CoO4
粉防已堿英文名稱:Powder anti alkali分子式:分子量::
2,4,5-三咪唑分子式:445.77英文名稱:2,4,5- three:1746-25-4分子量: C3HI3N2
1-羥-2-萘甲英文名稱:1- hydroxy -2-分子式:188.18分子量: C11H8O3:86-48-6
六鈷酸鉀分子式:332.33英文名稱:Six cyanocobalamin potassium:13963-58-1分子量: C6CoK3N6
4-溴-2-氟分子式:英文名稱:4- bromo -2- fluoro iodo:分子量:
5-羥甲噻唑分子式:115.15英文名稱:5- hydroxymethyl thiazole:38585-74-9分子量: C4H5NOS
4-乙炔聯(lián)分子式:178.23英文名稱:4- acetylene:29079-00-3分子量: C14H10
銀杏(C17:1)英文名稱:Ginkgo biloba (C17:1)分子式:374.5612分子量:C24H38O3:
2-氟-5-(三氟甲)吡分子式:165.09英文名稱:2- -5- (three) pyridine:69045-82-5分子量: C6H3F4N
神經(jīng)生長因子誘導蛋白抗體脂蛋白脂酶(LIPD)重組蛋白英文名稱:Recombinant Lipase, Lipoprotein (LIPD)
HEL(人紅白細胞白血病細胞)HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞
卵巢英文名稱:A2780
泡盛曲霉 Aspergillus awamori大鼠卵巢上皮細胞*培養(yǎng)基
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人腺腺細胞英文名稱:MDA-MB-436
檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
GH3(大鼠垂體瘤細胞)5×106cells/瓶×2
Hepa 1-6, 小鼠肝細胞NCI-H205(人腎上腺腺瘤細胞)
CoC1/DDP(人卵巢耐藥細胞亞株)5×106cells/瓶×2
GBC-SD(人膽囊細胞)5×106cells/瓶×2
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)激活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。