抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
3)真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
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英文名稱 Anti-VEGF-A
中文名稱 血管內皮生長因子A抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Sheep, Guinea Pig, Bovine, G
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 腫瘤 心血管 信號轉導 生長因子和激素 血管內皮細胞
蛋白分子量 predicted molecular weight: 24kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human VEGFA
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 Vascuoar endothelial growth factor A; VEGF A; vascular endothelial growth factor A isoform 2 precursor; Vegf; VEGFA; MGC70609; MVCD1; VEGF; VPF; VEGFA_HUMAN; Vascular endothelial growth factor A; VEGF-A; Vascular permeability factor; VPF; VEGF A Precursor.
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.和
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
乙分子式:168.21英文名稱:Phenyl vinyl:5535-48-8分子量: C8H8O2S
對氟分子式:222英文名稱:The fluorine iodobenzene:352-34-1分子量: FC6H4I;C6H4FI
4-(2-羥乙氧)砜分子式:338.37英文名稱:4- (2- hydroxy group B) phenyl group:27205-03-4分子量: C16H18O6S
性媒介深黃GG英文名稱:Acid medium deep yellow GG分子式:366.26分子量: C13H8N2Na2O6S:6054-99-5
氧鋁/納米氧鋁分子式:101.96英文名稱:Alumina / nano alumina:1344-28-1分子量: Al2O3
3-溴-6-羥-2-甲吡分子式:188.02英文名稱:3- -6- hydroxy -2- methyl pyridine:54923-31-8分子量: C6H6BrNO
巴卡丁III英文名稱:Baccatin III分子式:586.63分子量:C31H38O11:27548-93-2
橙黃Ⅱ英文名稱:Orange分子式:350.32分子量: C16H11N2NaO4S:633-96-5
苦玄參苷IA英文名稱:Picfeltarraenin IA分子式:762.92318分子量:C41H62O13:97230-47-2
2-(對甲)吡分子式:169.23英文名稱:2- (for toluene based) pyridine:937735分子量: C12H11N
DL-α-Tocopherolmethoxypolyethyleneglycolsuccinatesolution英文名稱:DL- -Tocopherol methoxypolyethylene glycol succinate solution分子式:分子量::1309573-60-1
血管內皮生長因子A抗體玫瑰小雙孢菌 Microbispora rosea金龜子綠僵菌 Metarhizium anisopliae
七葉苷發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
植物桿菌 Lactobacillus plantarum大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
HAN(人羊膜細胞)5×106cells/瓶×2
品紅亞硫酸鈉瓊脂/Fuchsin Basic Sodium Sulfite Agar飲用水,水源中總大腸菌群的選擇性分離和確認250克國產(chǎn)/進口
熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens植物桿菌 Lactobacillus plantarum
NAMALWA(人Burkitt's淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii黑木耳 Auricularia auricula
COLO 205(人結腸細胞)5×106cells/瓶×2
42℃生長培養(yǎng)基/42℃ Growth Medium副溶血弧菌42℃生長試驗250克國產(chǎn)/進口
細胞名稱黑曲霉 Aspergillus niger
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)激活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。