抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
3)真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
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英文名稱 Anti-Visual Arrestin
中文名稱 視覺抑制蛋白抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, cpw
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 細胞生物 神經(jīng)生物學 細胞膜受體 G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號 細胞膜蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 45kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Visual Arrestin
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 V-Arrestin;Visual-Arrestin.arrestin; 48 kDa protein;Retinal S-antigen; S-AG; Rod photoreceptor arrestin.
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.和
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
甲紅英文名稱:Methyl red分子式:269.3分子量: C15H15N3O2;(CH3)2<:493-52-7
四硼酸鉀分子式:305.5英文名稱:Four boric acid:12045-78-2分子量: K2B4O7·4H2O
2,4-滴異辛酯英文名稱:2,4- drops of isooctyl分子式:333.25分子量: C16H22Cl2O3:25168-26-7
雙(三氟-2,4-戊二酮)錳分子式:361.1英文名稱:Double (three fluoro -2,4- base manganese pentanedione):20080-72-2分子量: C10H8F6MnO4
4-羥吡分子式:95.1英文名稱:4- hydroxy pyridine:626-64-2分子量: C5H5NO
鎘試劑英文名稱:Cadmium reagent分子式:346.34分子量: C18H14N6O2:5392-67-6
2-甲嘧分子式:94.11英文名稱:2- methyl group:5053-43-0分子量: C5H6N2
高純碳酸鍶分子式:147.63英文名稱:High purity strontium carbonate:1633-05-2分子量: SrCO3
1,3-二溴-5-氯分子式:270.35英文名稱:1,3- dibromo -5- chlorobenzene:14862-52-3分子量: C6H3Br2Cl
1-芐-4-N-boc-分子式:290.4英文名稱:1- benzyl -4-N-boc- piperidine:73889-19-7分子量: C17H26N2O2
2,6-二氯代吡-N-氧物分子式:163.99英文名稱:2,6- two chloride pyridine -N- oxide:2587-00-0分子量: C5H3Cl2NO
視覺抑制蛋白抗體豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vignaA-498(人腎細胞)
明膠瓊脂培養(yǎng)基/Gelatin Agar Medium250克國產(chǎn)/進口
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(未分化)英文名稱:PC-12(未分化)
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti鏈霉菌 Streptomyces sp.
豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum帚石南棒桿菌 Corynebacterium callunae
香菇 Lentinula edodes酸球菌 Lactococcus lactis
小鼠白血病克隆細胞系英文名稱:L6565
改良沙氏瓊脂培養(yǎng)基/Sabouraud′s Agar,Modified真菌檢測250克國產(chǎn)/進口
膨端青霉 Penicillium inflatum苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
大鼠內(nèi)膜上細胞*培養(yǎng)基100mL
THP-1人單核白血病細胞香菇 Lentinula edodes
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)激活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。