抗體的定義:
抗體(antibody),(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌,被免疫系統(tǒng)用來(lái)鑒別與中和外來(lái)物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì),僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中,及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面??贵w能識(shí)別特定外來(lái)物的一個(gè)*特征,該外來(lái)目標(biāo)被稱為抗原。
動(dòng)物抗體功能分類:
①豬抗體:豬瘟抗體,豬藍(lán)耳抗體,豬圓環(huán)病毒抗體,豬偽狂犬抗體,豬細(xì)小病毒抗體,豬口蹄疫抗體,豬流感抗體等。
②禽抗體:小鵝瘟抗體,鴨肝抗體抗體,鴨漿膜炎抗體,禽流感抗體,新城疫抗體等
③??贵w:牛口蹄疫抗體,奶牛乳房炎抗體,牛流行熱抗體,牛病毒性腹瀉抗體,牛出血性敗血癥抗體等
④羊抗體:羊痘抗體,羊口蹄疫抗體,羊小反芻獸疫抗體,羊快疫抗體,羊腸毒血癥抗體,羊猝疽抗體,羊黑疫抗體等。
⑤犬抗體:犬狂犬病抗體、犬瘟熱抗體、犬副流感抗體、犬腺病毒抗體與犬細(xì)小病毒病抗體,狐貉水貂的偽狂犬抗體、細(xì)小病毒抗體、乙腦抗體等。
液泡分選蛋白4抗體產(chǎn)品應(yīng)用
英文名稱 Anti-VPS4a
中文名稱 液泡分選蛋白4抗體
別 名 hVPS4; SKD1; SKD1 homolog; SKD2; Vacuolar protein sorting 4 homolog A; vacuolar sorting protein 4; VPS4.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Rabbit, Zebrafish
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 細(xì)胞周期蛋白 細(xì)胞分化
蛋白分子量 predicted molecular weight: 48kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human VPS4a
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
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抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
亮甲酚藍(lán)英文名稱:Brilliant cresyl blue分子式:332.83分子量: C17H21ClN4O:10127-36-3
石炭品紅英文名稱:Carbolfuchsin分子式:分子量::4197-24-4
1-N-Cbz-3--分子式:234.29英文名稱:1-N-Cbz-3- amino piperidine:711002-74-3分子量: C13H18N2O2
五氟分子式:198.09英文名稱:Five fluorine hydrazine:828-73-9分子量: C6H3F5N2
3,4-二氟硝分子式:159.09英文名稱:3,4- two:369-34-6分子量: C6H3F2NO2
銀杏(C15:1)英文名稱:Ginkgo biloba (C15:1)分子式:346.5076分子量:C22H34O3:22910-60-7
2-惡唑分子式:84.08英文名稱:2惡唑:4570-45-0分子量: C3H4N2O
辛可尼丁英文名稱:Sin Coenen Martin分子式:294.39分子量:C19H22N2O:485-71-2
2-硝分子式:153.14英文名稱:2- 4-dinitrophenylhydrazine:3034-19-3分子量: C6H7N3O2
堿式乙酸鋁分子式:162.08英文名稱:Basic aluminum acetate:142-03-0分子量: Al(OH)C4H6O4; Al(OH)(CH3COO)2
N,N-二甲二茂鐵分子式:243.13英文名稱:N N-, two methyl two ferrocene amine:1271-86-9分子量: C13H17FeN
液泡分選蛋白4抗體直絲紫鏈霉菌 Streptomyces rectiviolaceus 細(xì)胞名稱
EAC(小鼠艾氏腹水細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人腎管狀上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基人胃粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
S180/小鼠腹水瘤株國(guó)產(chǎn)
氨酰tRNA合成酶復(fù)合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Aminoacyl tRNA Synthetase Complex Interacting Multifunctional Protein 1 (AIMP1)
CLED培養(yǎng)基添加劑/CLED Medium Supplement加入100mlC.L.E.D培養(yǎng)基中1毫升×5支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人膀胱上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
SK-N-SH(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
GH3(大鼠垂體瘤細(xì)胞)大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
ZR-75-1(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL