抗體的定義:
抗體(antibody),(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌,被免疫系統(tǒng)用來(lái)鑒別與中和外來(lái)物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì),僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中,及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面??贵w能識(shí)別特定外來(lái)物的一個(gè)*特征,該外來(lái)目標(biāo)被稱為抗原。
動(dòng)物抗體功能分類:
①豬抗體:豬瘟抗體,豬藍(lán)耳抗體,豬圓環(huán)病毒抗體,豬偽狂犬抗體,豬細(xì)小病毒抗體,豬口蹄疫抗體,豬流感抗體等。
②禽抗體:小鵝瘟抗體,鴨肝抗體抗體,鴨漿膜炎抗體,禽流感抗體,新城疫抗體等
③??贵w:??谔阋呖贵w,奶牛乳房炎抗體,牛流行熱抗體,牛病毒性腹瀉抗體,牛出血性敗血癥抗體等
④羊抗體:羊痘抗體,羊口蹄疫抗體,羊小反芻獸疫抗體,羊快疫抗體,羊腸毒血癥抗體,羊猝疽抗體,羊黑疫抗體等。
⑤犬抗體:犬狂犬病抗體、犬瘟熱抗體、犬副流感抗體、犬腺病毒抗體與犬細(xì)小病毒病抗體,狐貉水貂的偽狂犬抗體、細(xì)小病毒抗體、乙腦抗體等。
WNT蛋白家族Wnt8b抗體產(chǎn)品應(yīng)用
英文名稱 Anti-Wnt8b
中文名稱 WNT蛋白家族Wnt8b抗體
別 名 Protein Wnt-8b; Wingless related MMTV integration site 8b; Wingless type MMTV integration site family, member 8B; Wnt 8b; Wnt8 b; Wnt8b; WNT8B_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞
蛋白分子量 predicted molecular weight: 36kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Wnt8b
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
?
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
普魯士藍(lán)英文名稱:Blue分子式:859.23分子量: C18Fe7N18; Fe4[Fe(CN)6]:14038-43-8
溴酚藍(lán)英文名稱:Bromine phenol blue分子式:669.96分子量: C19H10Br4O5S:115-39-9
1-(二甲乙甲硅烷)咪唑分子式:154.29英文名稱:1- (two methyl ethyl methyl group):62365-34-8分子量: C7H14N2Si
氘代2-氯聯(lián)分子式:193.68英文名稱:Deuterium substituted 2-:51624-35-2分子量: C12H4ClD5
三異丙氧硼氫鉀分子式:228.18英文名稱:Three potassium oxygen group:42278-67-1分子量: C9H22BKO3
二乙鋁分子式:212.01英文名稱:Two ethyl aluminum iodide:2040-00-8分子量: C4H10AlI
間溴甲分子式:171.04英文名稱:Between toluene:591-17-3分子量: C7H7Br
4-聯(lián)氧磷二酯英文名稱:4- two phenyl phosphate ester分子式:402.38分子量: C24H19O4P:17269-99-7
3-溴-2-甲氧吡分子式:188.02英文名稱:3- bromide -2- a:13472-59-8分子量: C6H6BrNO
茜素絡(luò)合指示劑英文名稱:Alizarin complexone分子式:385.32分子量: C19H15NO8:3952-78-1
β,β-氧二英文名稱:Beta, beta two oxygen propionitrile分子式:124.14分子量: C6H8N2O:1656-48-0
WNT蛋白家族Wnt8b抗體干細(xì)胞因子(SCF)重組蛋白英文名稱:Recombinant Stem Cell Factor (SCF)
人成骨瘤細(xì)胞英文名稱:MG-63
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
胚抗原(CEA)重組蛋白英文名稱:Recombinant Carcinoembryonic Antigen (CEA)
Jurkat全細(xì)胞裂解液鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
NCI-H524(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SK-Hep-1(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人十二指腸腺細(xì)胞英文名稱:HuTu-80
牛津瓊脂基礎(chǔ)/OXA基礎(chǔ)/Oxford Agar Base單增李氏菌的選擇性分離250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Ca Ski(人宮頸上皮細(xì)胞)歧皺青霉 Penicillium steckii
小鼠淋巴瘤細(xì)胞英文名稱:EL4.IL-2