抗體的定義:
抗體(antibody),(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細胞(效應(yīng)B細胞)分泌,被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì),僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動物的血液等體液中,及其B細胞的細胞膜表面。抗體能識別特定外來物的一個*特征,該外來目標被稱為抗原。
動物抗體功能分類:
①豬抗體:豬瘟抗體,豬藍耳抗體,豬圓環(huán)病毒抗體,豬偽狂犬抗體,豬細小病毒抗體,豬口蹄疫抗體,豬流感抗體等。
②禽抗體:小鵝瘟抗體,鴨肝抗體抗體,鴨漿膜炎抗體,禽流感抗體,新城疫抗體等
③牛抗體:??谔阋呖贵w,奶牛乳房炎抗體,牛流行熱抗體,牛病毒性腹瀉抗體,牛出血性敗血癥抗體等
④羊抗體:羊痘抗體,羊口蹄疫抗體,羊小反芻獸疫抗體,羊快疫抗體,羊腸毒血癥抗體,羊猝疽抗體,羊黑疫抗體等。
⑤犬抗體:犬狂犬病抗體、犬瘟熱抗體、犬副流感抗體、犬腺病毒抗體與犬細小病毒病抗體,狐貉水貂的偽狂犬抗體、細小病毒抗體、乙腦抗體等。
WBP2蛋白抗體產(chǎn)品應(yīng)用
英文名稱 Anti-WBP2
中文名稱 WBP2蛋白抗體
別 名 MGC18269; WBP 2; WBP-2; Wbp2; WBP2_HUMAN; WW domain binding protein 2; WW domain-binding protein 2.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 信號轉(zhuǎn)導 表觀遺傳學
蛋白分子量 predicted molecular weight: 28kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human WBP2
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
免疫熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡分子式:120.11英文名稱:1H-1,2,3- three and [4,5-b]:273-34-7分子量: C5H4N4
香葉木素英文名稱:Diosmetin分子式:300.26分子量:C16H12O6:520-34-3
N-BOC-2-羥甲分子式:215.29英文名稱:N-BOC-2- hydroxymethyl piperidine:157634-00-9分子量: C11H21NO3
2,5-雙(4-聯(lián))-1,3,4-二唑分子式:374.43英文名稱:2,5- bis (4-) -1,3,4- two:52385分子量: C26H18N2O
堿性品藍英文名稱:Basic blue分子式:分子量::
4-溴鹽分子式:244.96英文名稱:4- piperidine bromide hydrobromide:54288-70-9分子量: C5H11Br2N
全氟丁磺酸鉀分子式:338.19英文名稱:Potassium total fluoride:29420-49-3分子量: C4F9KO3S
4-三氟甲分子式:153.15英文名稱:4- three fluorine methyl piperidine:657-36-3分子量: C6H10F3N
Z907染料英文名稱:Dye 907分子式:870.11分子量: C42H52N6O4RuS2:502693-09-6
2-(2-羥)并惡唑分子式:211.22英文名稱:2- (2- hydroxyphenyl) benzoxazole:835-64-3分子量: C13H9NO2
3,5-二溴吡N-氧物分子式:252.89英文名稱:3,5- dibromopyridine N- oxide:2402-99-5分子量: C5H3Br2NO
WBP2蛋白抗體緩沖葡萄糖蛋白胨水/Buffer Glucose Peptone Water腸桿菌科細菌的甲基紅-VP試驗100克國產(chǎn)/進口
Lane Marker Loading Buffer(5x)/蛋白示蹤上樣緩沖液(非還原,5x)人腺細胞
覃狀青霉 Penicillium paxilli
不吸水鏈霉菌 Streptomyces ahygroscopicus溝腸桿菌 Enterobacter cloacae
球擬圓酵母 Torulopsis globosa酸球菌 Lactococcus lactis
FO(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2
HuH-6(人肝母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
GNM(人口腔鱗頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移細胞)5×106cells/瓶×2
大豆慢生根瘤菌釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensisJAR(人胎盤絨毛膜細胞)
3% NaC1氨基酸脫羧酶對照發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口