抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
3)真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
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英文名稱 Anti-Phospho-Wee1(Ser53)
中文名稱 磷酸化WEE1蛋白抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit
產品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領域 腫瘤 免疫學 信號轉導 轉錄調節(jié)因子 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 72kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human Wee1 around the phosphorylation site of Ser53 [ED(p-S)AF]
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 WEE1(phospho S53); DKFZp686I18166; EC 2.7.10.2; FLJ16446; Wee 1; Wee1 homolog; WEE1 homolog S. pombe; Wee1 like protein kinase; Wee1 tyrosine kinase; Wee1+ homolog; Wee1+ S. pombe homolog; WEE1A; Wee1A kinase; WEE1hu; WEE1 tyrosine kinase isoform 1; MGC105683; WEE1_HUMAN.
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.和
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
2-甲喹喔啉分子式:144.17英文名稱:2- methyl quinoxaline:7251-61-8分子量: C9H8N2
龍膽苦苷英文名稱:Gentiopicroside分子式:356.33分子量:C16H20O9:20831-76-9
4-甲氧-3,5-二甲-2-吡甲分子式:167.21英文名稱:4- methyl -3,5- two methyl -2- pyridine methanol:86604-78-6分子量: C9H13NO2
1,2-雙-2,5-二異丙磷分子式:418.58英文名稱:1,2- bis -2,5- two:136705-65-2分子量: C26H44P2
四亞甲亞砜分子式:104.17英文名稱:Methylene four:1600-44-8分子量: C4H8OS
醋硝豆素英文名稱:Vinegar nitrate分子式:353.33分子量: C19H15NO6:152-72-7
2-(三溴甲磺酰)吡分子式:393.88英文名稱:2- (three) pyridine:59626-33-4分子量: C6H4Br3NO2S
胭脂紅英文名稱:Carmine分子式:492.39分子量: C22H20O13:1390-65-4
2-己-6-吡分子式:英文名稱:2- -6- cyclohexyl phenyl pyridine:499158-97-3分子量: C17H21N
2-羥甲-5-甲氧并咪唑分子式:178.19英文名稱:2- hydroxy -5- methoxy methyl benzimidazole:20033-99-2分子量: C9H10N2O2
(R)-(-)-DBD-APy分子式:311.36英文名稱:(R)-(-)- DBD治療:143112-49-6分子量: C12H17N5O3S
磷酸化WEE1蛋白抗體枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis嗜水氣單胞菌 Aeromonas hydrophila
HGC-27(人胃細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腸靜脈內皮細胞*培養(yǎng)基SW-13(人腎上腺皮質細胞)
人淋巴內皮細胞*培養(yǎng)基100mL
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes植物桿菌 Lactobacillus Plantarum
7% NaC1胰胨水發(fā)酵管BR20支國產/進口
月桂基硫酸鹽胰蛋白胨MUG培養(yǎng)基/月桂基硫酸鹽胰蛋白胨4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養(yǎng)基/LST-MUG Medium大腸桿菌O157檢測250克國產/進口
亮白曲霉 Aspergillus candidus小鼠成骨細胞*培養(yǎng)基
中分子量單一蛋白Marker(27 kD)50次國產
α1-抗胰(α1ACT)重組蛋白英文名稱:Recombinant Alpha-1-Antichymotrypsin (a1ACT)
豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum皺褶假絲酵母 Candida rugosa
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)激活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺激機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。