抗體的鑒定：
1）抗體的效價(jià)鑒定：鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。
2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力?？贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線(xiàn),計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
3）真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
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英文名稱(chēng) Anti-Phospho-WNK1(Thr60)
中文名稱(chēng) 磷酸化賴(lài)氨酸缺陷型蛋白激酶1抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 251kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human WNK1 around the phosphorylation site of Thr60
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 Erythrocyte 65 kDa protein; HSAN2; HSN2; hWNK1; KDP; KIAA0344; Kinase deficient protein; MGC163339; MGC163341; p65; PRKWNK1; Prostate derived sterile 20 like kinase; Protein kinase lysine deficient 1; Protein kinase lysine-deficient 1; Protein kinase with no lysine 1; PSK; Serine/threonine protein kinase WNK1; Serine/threonine-protein kinase WNK1; With no K; WNK lysine deficient protein kinase 1; WNK1; WNK1_HUMAN.
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抗體制備過(guò)程：
1.材料與試劑
a．提取的動(dòng)物 Ig
b．弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c．和
d．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e．其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實(shí)驗(yàn)活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無(wú)菌采制）
2-溴-6-氯吡分子式：192.44英文名稱(chēng)：2- -6- chloride：5140-72-7分子量： C5H3BrClN
2,3-二喹喔啉分子式：282.34英文名稱(chēng)：2,3- two phenyl quinoxaline：1684-14-6分子量： C20H14N2
9-(4-溴)咔唑分子式：322.2英文名稱(chēng)：9 -（4 -溴）咔唑：57102-42-8分子量： C18H12BrN
3-甲酸甲酯鹽酸鹽分子式：165.61798英文名稱(chēng)：3- methyl piperidine hydrochloride：分子量： C6H12ClNO2
2-氯-4-氟甲分子式：144.57英文名稱(chēng)：2- -4- fluoride：452-73-3分子量： C7H6ClF
硫錳分子式：87英文名稱(chēng)：Manganese sulfide：18820-29-6分子量： MnS
5-溴-8-硝異喹啉分子式：253.06英文名稱(chēng)：5- -8- nitro group：63927-23-1分子量： C9H5BrN2O2
1,8-二溴萘分子式：285.96英文名稱(chēng)：1,8- dibromine naphthalene：分子量： C10H6Br2
1,2,4,5-四溴-3,6-二(五溴氧)分子式：1366.85英文名稱(chēng)：1,2,4,5- four -3,6- two (five bromo methoxy benzene bromobenzene)：58965-66-5分子量： C18Br14O2
6--4-羥喹啉分子式：271.05英文名稱(chēng)：6- hydroxy -4-：342617-07-6分子量： C9H6INO
8-萘-1,6-二磺英文名稱(chēng)：8- two sulfonic acid分子式：303.31分子量： C10H9NO6S2：129-91-9
磷酸化賴(lài)氨酸缺陷型蛋白激酶1抗體LB-Top Agar大腸桿菌增殖250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis胰凝蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)
L-O2(人正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
3% NaC1氨酸脫羧酶發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
植物桿菌 Lactobacillus plantarum溝腸桿菌 Enterobacter cloacae
中分子量蛋白Marker50次國(guó)產(chǎn)
NCI-H205(人腎上腺腺瘤細(xì)胞)櫟迷孔菌
PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
緩沖-甘油鈉溶液 規(guī)格： 250g 用途： 用于樣品的保存。（GB 4789.13-2010）
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeSH-SY5Y(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)
T1N1瓊脂/ T1N1 Agar霍亂弧菌的培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
實(shí)驗(yàn)原理 :
（1）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞，通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而，抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。
（2）激活補(bǔ)體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
（3）結(jié)合細(xì)胞：不同類(lèi)別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，參與免疫應(yīng)答。
（4）可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
（6）抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類(lèi)沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
