實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)激活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
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英文名稱 Anti-14-3-3 epsilon/YWHAE
中文名稱 14-3-3E蛋白抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 細(xì)胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 29kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human 14-3-3E C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 14-3-3 epsilon; 14 3 3 E; 14 3 3 epsilon; 14 3 3E; 14-3-3 E; 14-3-3 protein epsilon; 14-3-3E; 1433E_HUMAN; KCIP 1; KCIP-1; KCIP1; MDCR; MDS; mitochondrial import stimulation factor L subunit; protein kinase C inhibitor protein-1; Protein kinase C inhibitor protein1; Tyrosine 3 monooxygenase/tryptophan 5 monooxygenase activation protein, epsilon polypeptide; tyrosine 3/tryptophan 5 -monooxygenase activation protein epsilon polypeptide; Tyrosine 3/tryptophan 5 monooxygenase activation protein epsilon polypeptide; YWHAE.
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.和
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
抗體的鑒定:
1)抗體的效價(jià)鑒定:鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力??贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
3)真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
3-氯-2-氟甲分子式:144.57英文名稱:3- -2- fluoride:85089-31-2分子量: C7H6ClF
月桂酸鉀分子式:238.41英文名稱:Potassium potassium:10124-65-9分子量: C12H23KO2
3-吡唑分子式:83.09英文名稱:3- amino group:1820-80-0分子量: C3H5N3
貝母素甲英文名稱:Peimine分子式:431.6511分子量:C27H45NO3:23496-41-5
喹啉酸分子式:167.12英文名稱:Acid:89-00-9分子量: C7H5NO4
3,3,5,5-四甲-1-吡咯啉N-氧物分子式:141.21英文名稱:3,3,5,5- four -1- N-:10135-38-3分子量: C8H15NO
壬二酸二酰分子式:216.28英文名稱:Two azelaic acid hydrazide:4080-95-9分子量: C9H20N4O2
3-溴三氟硼酸鉀分子式:262.9英文名稱:3- Bromophenyl three kbf4:374564-34-8分子量: C6H4BBrF3K
嘧肟草英文名稱:Ether of the分子式:609.59分子量: C32H27N5O8:168088-61-7
腈英文名稱:Benzene acetonitrile分子式:117.15分子量: C8H7N:140-29-4
乙-乙銨緩沖溶液英文名稱:Acetic acid ammonium acetate buffer solution分子式:分子量::
14-3-3E蛋白抗體BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞
豬脫氧膽酸//異去氧膽酸/二羥基膽烷酸/Hyodeoxycholic acidBR,98%10/25/100克國產(chǎn)/進(jìn)口
孢洛德酵母 Lodderomyces elongisporus
小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
Flag標(biāo)簽蛋白裂解液TSCCa(人舌鱗細(xì)胞)
酵母浸出粉胨葡萄糖湯/YPD湯/YEPD湯/Yeast Extract Peptone Dextrose BrothBR250克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
屎腸球菌 Enterococcus faecium糞產(chǎn)堿菌 Alcaligenes facelis
酪蛋白氨基酸/酪蛋白水解物/Casamino acidBR100/500克國產(chǎn)/進(jìn)口
酸鏈球菌 Streptococcus lactis胎兒表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基
WPMY-1(人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞)5×106cells/瓶×2