抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
3)真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
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英文名稱 Anti-ZNF185
中文名稱 鋅指蛋白185抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 染色質(zhì)和核信號 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 76(human)/39(mo, rat)kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ZNF185
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 LIM domain protein ZNF185; P1 A; Zinc finger protein 185 (LIM domain); ZN185_HUMAN.
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.和
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
亞硫酸鉀分子式:158.26英文名稱:Potassium sulfite:10117-38-1分子量: K2SO3
2,5-二巰-1,3,4-噻二唑分子式:150.24英文名稱:2,5- two -1,3,4- two:1072-71-5分子量: C2H2N2S3
四氮唑分子式:70.05英文名稱:Tetrazole:288-94-8分子量: CH2N4
固綠FCF英文名稱:Solid green FCF分子式:808.91分子量::2353-45-9
2-氯-4-嘧分子式:139.54英文名稱:2- chloro -4- cyano pyrimidine:75833-38-4分子量: C5H2ClN3
環(huán)己氯鎂英文名稱:Cyclohexyl chloride分子式:142.91分子量: C6H11ClMg:931-51-1
地膚子皂苷Ic英文名稱:Momordin Ic分子式:764.93906分子量:C41H64O13:96990-18-0
甲芐分子式:221.3英文名稱:Methyl benzyl hydrazine:671-16-9分子量: C12H19N3O
茜素黃GG英文名稱:Alizarin Yellow GG分子式:309.21分子量: C13H8N3NaO5:584-42-9-
1,2-雙(*硅烷)分子式:222.48英文名稱:1,2- bis (three methyl silicone) benzene:17151-09-6分子量: C12H22Si2
2,3-二氯吡分子式:147.99英文名稱:2,3- two:2402-77-9分子量: C5H3Cl2N
鋅指蛋白185抗體人支氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
Ca Ski, 人宮頸細(xì)胞串珠菌 Leuconostoc lactis
粘紅酵母 Rhodotorula glutinis豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
SK-Hep-1(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae爪哇根霉 Rhizopus javanicus
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化)英文名稱:PC-12(高分化)
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
DMEM/F12培養(yǎng)基/F-12(DMEM)BR10升國產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠膀胱成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)激活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。