腦缺血再灌注模型
腦缺血再灌注模型:大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)模型是研究缺血性腦zhong風(fēng)的經(jīng)典動(dòng)物模型。該模型阻斷頸外動(dòng)脈及其分支,且阻斷翼腭動(dòng)脈,以切斷顱外來(lái)源的側(cè)副循環(huán)血流。從頸外動(dòng)脈插入栓線,經(jīng)頸內(nèi)動(dòng)脈到大腦前動(dòng)脈,機(jī)械性阻斷大腦中動(dòng)脈發(fā)出處的血供來(lái)建立大腦中動(dòng)脈缺血模型。需要再灌注,只需拔出栓線結(jié)扎傷口即可恢復(fù)大腦血供。
實(shí)驗(yàn)流程:
1、前期溝通:接收客戶方案并審核可行性;
2、實(shí)驗(yàn)步驟:動(dòng)物麻醉→分離頸總、頸外和頸內(nèi)動(dòng)脈→夾閉頸內(nèi)動(dòng)脈和頸總動(dòng)脈→頸內(nèi)動(dòng)脈內(nèi)插入線栓→縫合傷口→2h后拔掉線栓→補(bǔ)充生理鹽水并動(dòng)物保溫;
3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:實(shí)驗(yàn)報(bào)告
觀察指標(biāo):主要集中在其動(dòng)物模型的行為學(xué),皮質(zhì)、海馬區(qū)組織形態(tài)學(xué)、神經(jīng)生化學(xué)、腦血流及血液流變學(xué)指標(biāo)的研究領(lǐng)域上,把記憶認(rèn)知功能缺損的改善作為一個(gè)主要標(biāo)準(zhǔn)。
行為學(xué)指標(biāo),造模后的動(dòng)物均表現(xiàn)出明顯的學(xué)習(xí)記憶能力障礙。目前常采用跳臺(tái)法、避暗法、穿梭箱法來(lái)測(cè)定動(dòng)物一次性被動(dòng)回避反射能力 ; Y 形水迷宮實(shí)驗(yàn)、 Morris 水 迷宮實(shí) 驗(yàn)、八臂迷宮實(shí)驗(yàn)等測(cè)定 VD 動(dòng)物空間分辨學(xué)習(xí)記憶能力。
組織形態(tài)學(xué)指標(biāo),皮質(zhì)及海馬區(qū)的神經(jīng)細(xì)胞的變化。海馬區(qū)是腦缺血最敏感的區(qū)域 ,海馬是腦內(nèi)參與記憶儲(chǔ)存功能的重要部分。海馬 CA1 區(qū)在學(xué)習(xí)記憶中起重要作用。
形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)模型組大鼠海馬 CA1 區(qū)細(xì)胞排列稀疏、雜亂、細(xì)胞線不清晰, 錐體細(xì)胞明顯減少、尼氏體減少。
(一)神經(jīng)功能學(xué)評(píng)分
神經(jīng)功能包括意識(shí)狀態(tài)、運(yùn)動(dòng)、感覺(jué)、視覺(jué)、共濟(jì)和神經(jīng)反射等多方面,在臨床神經(jīng)功能檢查中以上方面都會(huì)得到體現(xiàn)。MCAO動(dòng)物研究中,可根據(jù)動(dòng)物的生理病理特點(diǎn),從運(yùn)動(dòng)、感覺(jué)、意識(shí)、神經(jīng)反射等方面檢測(cè)動(dòng)物的神經(jīng)功能損傷和恢復(fù)程度。神經(jīng)功能學(xué)評(píng)價(jià)不僅是判斷模型成功與否的指標(biāo),也為觀測(cè)病理生理發(fā)生發(fā)展的進(jìn)程、模型規(guī)范化及藥物干預(yù)的研究提供了一定的依據(jù)。