特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:植物中鈉濃度測試盒火焰光度法
產(chǎn)品規(guī)格:咨詢
檢測方法:火焰光度法
產(chǎn)品貨號:BK-01S6814
產(chǎn)品分類:離子系列
商品介紹:
測定意義: 鈉保持機體的正常滲透壓及酸堿平衡,參與糖及蛋白代謝,對維持機體的正常功能有非常重要的作用 測定原理 濃硫酸高溫消解植物樣品,采用火焰光度計測定樣品中的鈉含量。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本: 先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
2 ug SB-T6 SB-T6 低溫運輸,-20℃保存
500次 液相內(nèi)毒素清除劑 Solution Endotoxin Erasol 4℃保存
2 ug pEXP-Lib pEXP-Lib 低溫運輸,-20℃保存
商業(yè)無菌檢驗
1瓶 AGS細胞株 AGS 低溫運輸和保存
糖瓊脂(PDA)顆粒 Potato Dextrose Agar 300ml/袋*10
5次 cDNA文庫構(gòu)建試劑盒 cDNA Library Construction Kit Dr. GenTLE Precipitation Carrier 4℃保存,3 M Sodium Acetate(pH5.2) 4℃保存,Spin Column 4℃保存,F(xiàn)ALCON Tube 常溫保存,E.coli Electro-Cells -80℃保存,SOC 4℃保存,其他組份-20℃保存
500mL MOPS Buffered Saline,5X,pH7.0 MOPS Buffered Saline,5X,pH7.0 常溫保存
100uL 植物葉綠體TrnL PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存
2 ug pAOX1 pAOX1 低溫運輸,-20℃保存
三號膽鹽 No. 3 Bile Salt 100g
植物中鈉濃度測試盒火焰光度法phospho-CDKN1A/P21 (Ser130) 磷酸化p21蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
GIMAP8 GTPIMAP家族成員8抗體 規(guī)格: 0.2ml
Leptin 瘦素抗體 規(guī)格: 0.1ml
TRIP1/PSMC5 甲狀受體相互作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
IL-6 白介素6抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-CD32B(Tyr291) 磷酸化CD32B抗體 規(guī)格: 0.1ml
HHV4/CMV 人類巨細胞毒抗體 規(guī)格: 0.2ml
GIG22/DNAJC15 細胞生抑制蛋白22抗體(甲基化控制J蛋白) 規(guī)格: 0.2ml
NPY2R 神經(jīng)肽Y受體2抗體 規(guī)格: 0.1ml
CUTA 乙酰酯相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
STK40 絲/蘇蛋白激40抗體 規(guī)格: 0.2ml
CK12/Cytokeratin 12 細胞角蛋白12抗體 0.2ml
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。