注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:土壤脲酶(SUE)測試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
檢測方法:微量法
產(chǎn)品貨號:BK-01S6818
產(chǎn)品分類:土壤系列
商品介紹:
測定意義: 鈉是某些植物生長所必需的營養(yǎng)元素,植物缺鈉后出現(xiàn)黃化病。鹽生植物中往往以Na+調(diào)節(jié)滲透勢,降低細(xì)胞水勢,促進(jìn)細(xì)胞吸水。對土壤中的鈉元素的研究,為進(jìn)一步研究森林的養(yǎng)分循環(huán)、森林的經(jīng)營措施提供基礎(chǔ),從而更好的保護(hù)植物和生態(tài)環(huán)境。 測定原理 混合酸高溫消解土壤樣品,采用火焰光度計測定樣品中的鈉含量。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
改良愛德華瓊脂基礎(chǔ) Edwards Medium,Modified 250g
100mg Cytochrome C -20℃保存
50T 腸道病毒EV71 PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
20L 長效期SDS-PAGE電泳液(干粉)(適合2-30 kD蛋白) Stable SDS-PAGE Running Buffer 常溫保存
100mL Tricine Buffer,0.5M,pH8.0 Tricine Buffer,0.5M,pH8.0 常溫保存
4次 大提柱式細(xì)菌DNAout(含) Maxi Column Bacterial DNAOUT 常溫保存(需要-20℃保存)
2 ug pET-14b pET-14b 低溫運輸,-20℃保存
采樣吸收液1-GVPC液體 GVPC Liquid Medium 100g
1瓶 293A細(xì)胞株 293A 低溫運輸和保存
1000支 200 μL RNase-free 黃吸頭(盒裝已滅菌) 常溫
48 T 羥測試盒(消化法)(測培養(yǎng)細(xì)胞、培養(yǎng)液) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
土壤脲酶(SUE)測試盒微量法Donkey Anti-human IgG/PE PE標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
ATR/ACTR/RAC3 絲/蘇蛋白激ATR抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-Goat IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml
Sema7A/CD108 軸突生因子CD108抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-CK18(Ser33) 磷酸化細(xì)胞角蛋白18抗體 規(guī)格: 0.1ml
GLT8D1 糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體 規(guī)格: 0.2ml
RRAGC RAS相關(guān)GTP結(jié)合蛋白C抗體 規(guī)格: 0.2ml
Transferrin receptor 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 規(guī)格: 0.1ml
phospho-VEGFR2(Tyr951) 磷酸化管內(nèi)皮生因子受體2抗體 規(guī)格: 0.1ml
GluR1/AMPA 谷受體1抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-FAS (Tyr291) 磷酸化載脂蛋白A1抗體 規(guī)格: 0.1ml