商品介紹：
測定意義: SDH（EC 1.3.5.1）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中。SDH是線粒體的一種標志酶，位于線粒體內(nèi)膜上的一種膜結合酶，是連接呼吸電子傳遞和氧化磷酸化的樞紐之一。此外，為多種原核細胞產(chǎn)能的呼吸鏈提供電子。 測定原理 SDH催化琥珀酸脫氫生成延胡索酸，脫下的氫通過吩嗪二甲酯硫酸（PMS）傳遞還原2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），并且在600nm處具有特征吸收峰，通過600nm吸光度的變化，測定2．6-DPIP的還原速度，代表SDH酶活性。 需自備的儀器和用品 可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
琥珀酸脫氫酶（SDH)測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6575 |
實驗結果判斷我有妙招：
1、定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應的物質(zhì)要密封，并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質(zhì)要密封保存，其相應的溶液較固體更易反應，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風處保存。
操作步驟：
1. 樣品的準備：
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
沙氏瓊脂平板9cm（2~25℃） 9cm*10
2 ug pSUPER-GFP-neo pSUPER-GFP-neo 低溫運輸，-20℃保存
SS瓊脂顆粒 SS Agar 300ml/袋*10
200U 9°Nm DNA聚合 9°Nm DNA Polymerase -20℃保存
250mL Para-formaldehyde fixative Solution Para-formaldehyde fixative Solution 常溫保存
5nmol 接頭DNA（Hind Ⅲ-Sma I） Adaptors -20℃保存
2 ug pMXB10 pMXB10 低溫運輸，-20℃保存
B5培養(yǎng)基 B5 Medium 250g
1瓶 SW620細胞株 SW620 低溫運輸和保存
葡萄糖半固體培養(yǎng)基 Dextrose Semisolid Medium 250g
100mL RNase-Free Potassium Chloride Solution（無RNase的溶液）,5M RNase-Free Potassium Chloride Solution,5M 常溫保存
琥珀酸脫氫酶（SDH)測試盒微量法HPV16 E7 protein 人瘤毒16型E7抗體 規(guī)格: 0.1ml
CADM 4 細胞粘附分子4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/RBITC 羅丹明標記的兔抗牛IgM 規(guī)格: 0.3ml
B-Raf B Raf抗體 規(guī)格: 0.1ml
HOXD10 同源盒蛋白HOXD10抗體 規(guī)格: 0.2ml
HAND1 心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Glucagon Receptor 受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
GABA Transporter 1/GAT-1 γ氨基丁酸運載蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Gold 膠體金標記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.5ml
DOM3Z DOM3Z蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
CTAG2 瘤/睪抗原2抗體 規(guī)格: 0.2ml
ER-beta 雌激素受體β 抗體 規(guī)格: 0.1ml
