商品介紹:
測定意義: 乳酸是生物體代謝過程中重要的中間產(chǎn)物,與糖代謝、脂類代謝、蛋白質(zhì)代謝及細(xì)胞內(nèi)能量代謝密切相關(guān),乳酸含量是評(píng)估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標(biāo)。 測定原理 乳酸在乳酸脫氫酶的作用下生成丙酮酸,同時(shí)使NAD+還原生成NADH和H+,H+傳遞給PMS生成的PMSH2還原INT生成紅色物質(zhì),在530nm處有特征吸收峰。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、研缽、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、微量石英比色皿、恒溫水浴鍋。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測,7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號(hào) |
乳酸含量(LA)測試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6587 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
10次 WGA 糖蛋白分離試劑盒 Glycoprotein Isolation Kit (WGA) -20℃保存
2 ug pEGFP- N1 pEGFP- N1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
石蕊牛奶培養(yǎng)基 Litmus Milk Medium 250g
100mL 曲拉通 X-100 Triton X-100 室溫保存
50T 豬流感病毒PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
200 mg Catalase(抗氧化) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
500mL Krebs-Ringer Solution [Bicarbonate Buffered] Krebs-Ringer Solution [Bicarbonate Buffered] 常溫保存
50次 雙一管式RT-PCR試劑盒(MMLV-Taq) Two-Enzyme One-Tube RT-PCR Kit -20℃保存
2 ug pLVX-IRES-mCherry pLVX-IRES-mCherry 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
1個(gè) 熒光尺 Fluorescent Ruler 室溫
1瓶 NR8383細(xì)胞株 NR8383 低溫運(yùn)輸和保存
乳酸含量(LA)測試盒微量法Protamine 2 魚蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-rabbit IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml
GIRK2/Kir3.2 G蛋白激活內(nèi)流鉀通道蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
BTBD1 BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白1(丙型毒的NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8)抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-SHC(Tyr239/240) 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
WDR26 心肌缺預(yù)處理正調(diào)節(jié)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-gp130(Ser 782) 磷酸化gp130抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.5ml
APBA3/Mint3/X11gamma β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml
AKIRIN2 AKIRIN2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
SCAP/SREBF chaperone protein 固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白裂解激活蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
HSP70/HSPA1A 熱休克蛋白-70抗體 規(guī)格: 0.1ml