本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
氨基酸（AA）含量測試盒可見分光光度法 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 | BK-01S6531 |
商品介紹：
測定意義: 動物肝臟、腎臟是氨基酸代謝的主要器官，故尿中氨基酸的變化最能反應(yīng)肝、腎的生理狀態(tài)。另外，氨基酸還能反應(yīng)灼傷、傷寒等方面情況。植物體內(nèi)氨基酸含量對研究植物在不同條件下及不同生長發(fā)育時期氮代謝變化、植物對氮素的吸收、運輸、同化及營養(yǎng)狀況等有重要意義。 測定原理： 氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應(yīng)，產(chǎn)生藍(lán)紫色化合物，在570 nm有特征吸收峰；通過測定570 nm吸光度，來計算氨基酸含量。 自備儀器及用品： 臺式離心機、水浴鍋、紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽、無水乙醇、冰和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
實驗結(jié)果判斷我有妙招：
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封，并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應(yīng)將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存，其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng)，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟：
1. 樣品的準(zhǔn)備：
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集細(xì)胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定，可以冰浴保存；如果當(dāng)天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品，但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
100mL HEPPSO Buffer,0.2M,pH7.0 HEPPSO Buffer,0.2M,pH7.0 常溫保存
1mL 2X PCR Mix（即用型PCR試劑盒3.0） Instant PCR Kit 3.0 -20℃保存
2 ug pLVX-EF1α-mCherry-N1 pLVX-EF1α-mCherry-N1 低溫運輸，-20℃保存
聯(lián)合固氮菌培養(yǎng)基 Combined nitrogen-fixing bacteria medium 250g
2 ug pHT315 pHT315 低溫運輸，-20℃保存
茜素-β-半乳糖苷肉湯（Aliz-gal肉湯） Aliz-gal Broth 100g
10mg apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白 apo-Transferrin Human 4℃保存
250mL Tris-Acetate Buffer,1M,pH7.0 Tris-Acetate Buffer,1M,pH7.0 常溫保存
1mL 卵白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，2mg/mL Ovalbumin Standard -20℃保存
2 ug pTrcCKS pTrcCKS 低溫運輸，-20℃保存
100mL 紅細(xì)胞裂解液C型（核酸純化） 4℃保存
氨基酸（AA）含量測試盒可見分光光度法Transferrin 轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
C10orf4/FRA10AC1 10號染色體開放閱讀框4抗體 規(guī)格: 0.2ml
UBE2W 泛素蛋白連接W抗體 規(guī)格: 0.2ml
Crkl 接蛋白CrkL抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 2ml
SHANK2 富含脯突觸相關(guān)蛋白SHANK2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-human IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的羊抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml
RSK3/Ribosomal S6 kinase 3 核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體 規(guī)格: 0.2ml
ARL8B ADP核糖基化樣因子8B抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-MEK6 (Ser207) 磷酸化絲裂原活化蛋白激MKK6抗體 規(guī)格: 0.1ml
ZWINT 著絲粒ZW10相互作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
CD8 CD8抗體 規(guī)格: 0.1ml
