商品介紹:
測定意義: 賴是人體必需氨基酸之一,能促進(jìn)人體發(fā)育、增強免疫功能,并有提高中樞神經(jīng)組織功能的作用。賴為堿性必需氨基酸。由于谷物食品中的賴含量甚低,且在加工過程中易被破壞而缺乏,故稱為限制性氨基酸。 測定原理: 蛋白質(zhì)中的賴具有一個游離的ε-NH2,它與茚三酮試劑反應(yīng)生成藍(lán)紫色物質(zhì),其顏色的深淺在一定范圍內(nèi)與賴的含量成線性關(guān)系。亮與賴的碳原子數(shù)目相同,而且僅有—個游離氨基(ε-NH2),所以通常用亮配制標(biāo)準(zhǔn)液。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水、水浴鍋。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
賴氨酸(LYS)測試盒可見分光光度法 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 | BK-01S6539 |
實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
2 ug pGBK-53 pGBK-53 低溫運輸,-20℃保存
100mL Tricine Buffer,0.5M,pH8.5 Tricine Buffer,0.5M,pH8.5 常溫保存
50mL 肝素瓊脂糖 Heparin Agarose 4℃保存
2 ug pUB6/V5 His C pUB6/V5 His C 低溫運輸,-20℃保存
100mL 非凍型組織DNA保存液 Tissue DNALOCKER 室溫
2 ug pDK46 pDK46 低溫運輸,-20℃保存
WILKINS-CHALGREN瓊脂 WILKINS-CHALGREN Agar 250g
100mL 交聯(lián)瓊脂糖凝膠 4B Sepharose CL-4B 4-8℃保存
50T 新城疫病毒RT-PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pYr-1.1-hU6-EGFP(可包裝腺病毒) pYr-1.1-hU6-EGFP(可包裝腺病毒) 低溫運輸,-20℃保存
MEM維持液 MEM maintenance of fluid 36支/盒
賴氨酸(LYS)測試盒可見分光光度法membrane glycoprotein E(VZV) 人水痘帶狀皰疹毒gE蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
CRTAM CRTAM抗體 規(guī)格: 0.2ml
Islet 1 胰島素基因增強結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
GHR 生激素受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
C22orf36 22號染色體開放閱讀框36抗體 規(guī)格: 0.2ml
S100A10 S100鈣結(jié)合蛋白A10抗體 規(guī)格: 0.2ml
LECT1 白細(xì)胞衍生化學(xué)吸引素抗體 規(guī)格: 0.2ml
BAP135/TFII I 蛋白酪激BAP135抗體 規(guī)格: 0.2ml
Caspase-9 白介素1-β轉(zhuǎn)化樣凋亡蛋白6抗體 規(guī)格: 0.1ml
ACCSL ACCSL蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
MUC5AC/Mucin 5AC 胃粘液素抗體 規(guī)格: 0.1ml
p53 (DO-1) 瘤抑制基因p53抗體 規(guī)格: 0.2ml