特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:植物類黃酮測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
檢測方法:可見分光光度法
產(chǎn)品貨號:BK-01S6444
產(chǎn)品分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
測定意義: 類黃酮是一類多苯化合物,屬于植物次生代謝物,對人體具有消炎,抗菌,降血脂,清除體內(nèi)羥自由基,預(yù)防癌癥等作用。 測定原理: 在堿性亞硝酸鹽溶液中,類黃酮與鋁離子形成在502nm處有特征吸收峰的紅色絡(luò)合物,測定樣品提取液在502nm處的吸光值,即可計算樣品類黃酮含量。 需自備的儀器和用品: 天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
50T 病毒H5亞型PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
1 mg JC-1 Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
50mL Calcium Acetate Solution(乙酸鈣溶液),0.2M Calcium Acetate Solution,0.2M 常溫保存
50次 柱式DNA PAGE膠回收試劑盒 Column PAGE DNABACK 4℃保存
2 ug pGL4.27[luc2P/minP/Hygro] pGL4.27[luc2P/minP/Hygro] 低溫運輸,-20℃保存
瓊脂培養(yǎng)基H Agar medium H(MacConkey agar) 250g
1瓶 HFL1細(xì)胞株 HFL1 低溫運輸和保存
李氏菌增菌肉湯(LB1) Listeria Enrichment Broth Base 9ml*20支/包
50U Furin 蛋白 Furin Protease -20℃保存
250mL RNase-Free Tris-HCl Solution(無RNase的Tris-HCl溶液),1M,pH7.4 RNase-Free Tris-HCl Solution,1M,pH7.4 常溫保存
1 管 MG1655大腸桿菌 MG1655 E.coli Strain -80℃保存
植物類黃酮測試盒可見分光光度法Phospho-Glucocorticoid Receptor (Ser211) 磷酸化糖皮質(zhì)激素受體抗體 規(guī)格: 0.1mlOSM/Oncostatin M 抑瘤素M抗體 規(guī)格: 0.1ml
MATK 酪蛋白激細(xì)胞分裂素抗體 規(guī)格: 0.2mlZNF415 鋅指蛋白415抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 規(guī)格: 0.1mlAlpha s2 Casein α-s2酪蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-TRADD(Ser274) 磷酸化瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-PRKD1(Ser742) 磷酸化蛋白激C mu型抗體 規(guī)格: 0.1ml
IGSF3 免疫球蛋白超家族成員3抗體 規(guī)格: 0.2mlMUC7 粘蛋白7抗體 規(guī)格: 0.2ml
CD105/Endoglin CD105抗體 規(guī)格: 0.1mlCA125/MUC16 卵巢抗原抗體 規(guī)格: 0.1ml
FGF1/AFGF 酸性成纖維細(xì)胞生因子抗體 規(guī)格: 0.1mlCG6856/CG6856-PA 果蠅CG6856-PA抗體 規(guī)格: 0.5ml
CD34 CD34抗體 規(guī)格: 0.1mlSMURF2 Smad蛋白E3泛素連接2抗體 規(guī)格: 0.2ml
RNF7/CKBBP1 環(huán)指蛋白7抗體 規(guī)格: 0.2mlNEK9 絲/蘇蛋白激NEK9抗體 規(guī)格: 0.2ml
CDMP1/GDF5 軟骨衍生形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlSRPK2 絲/蘇蛋白激SRPK2抗體 規(guī)格: 0.2ml
DP1/TFDP1 轉(zhuǎn)錄因子DP1抗體 規(guī)格: 0.1mlHMGCS1 三羥基三甲基輔A合成1 規(guī)格: 0.2ml
streptomycin 體 規(guī)格: 0.2mlCYP11B1 細(xì)胞色素P450 11B1抗體 規(guī)格: 0.1ml
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。