注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min）。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè)，通?？梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：葡萄糖氧化酶（GOD）測(cè)試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣
檢測(cè)方法：可見分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6418
產(chǎn)品分類：氧化與抗氧化系列
商品介紹：
測(cè)定意義: GOD（EC 1.1.3.4）廣泛存在于動(dòng)物、和植物中，催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并產(chǎn)生H2O2，是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。 測(cè)定原理： GOD催化產(chǎn)生H2O2，過氧化物酶在有氧存在時(shí)催化H2O2分解產(chǎn)生的氧又將鄰聯(lián)茴香胺氧化生成有色物質(zhì)，顏色深淺與葡萄糖氧化酶活性成線性關(guān)系。 試驗(yàn)中所需的儀器和設(shè)備： 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測(cè)液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測(cè)；若渾濁，離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
2 ug pMBP- C pMBP- C 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
營(yíng)養(yǎng)肉汁 Nutrient Broth 250g
1瓶 RM-1細(xì)胞株 RM-1 低溫運(yùn)輸和保存
乳糖膽鹽培養(yǎng)基 Lactose Bile Medium 250g
100g DEAE 纖維素 DEAE Cellulose 室溫干燥保存
50T 超級(jí)細(xì)菌PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
1000mL Tricine-SDS-PAGE配膠液 Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer 常溫保存
2 ug pBD-p53 pBD-p53 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
50次 分枝桿菌DNAout Myco DNAOUT 常溫
2 ug pET-19b pET-19b 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
血液瓊脂基礎(chǔ) Blood agar base 250g
葡萄糖氧化酶（GOD）測(cè)試盒可見分光光度法phospho-AQP2(Ser269) 磷酸化水通道蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1mlBCMA/CD269 B淋巴細(xì)胞成熟因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
SLC6A19 鉀依賴鈉鈣交換蛋白6 規(guī)格: 0.1mlVillin 絨毛蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-CHK2 (ser516) 磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體 規(guī)格: 0.1mlTFAR19/PDCD5 凋亡相關(guān)蛋白5抗體 規(guī)格: 0.1ml
Donkey Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.1mlFactor VIII 第八因子抗體 0.1ml
Donkey anti-human IgG whole serum 驢抗人IgG抗清 規(guī)格: 1mlCBFA1/RUNX2 核心結(jié)合因子α1抗體(成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子)Cbfα1 規(guī)格: 0.1ml
phospho-PRKCB(Ser642) 磷酸化蛋白激C抗體 規(guī)格: 0.1mlANKS6 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2ml
HCV-NS1 丙型毒-NS1抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-CREB-1(Ser121) 磷酸化CREB-1抗體 規(guī)格: 0.1ml
HLC3/Kanadaptin 肺基因蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2mlPCDHGC3/PCDH2 原鈣粘蛋白γC3抗體 規(guī)格: 0.2ml
BTG1 B細(xì)胞遷移基因1抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-IRAK4(Thr345) 磷酸化白介素-1受體相關(guān)激4抗體 規(guī)格: 0.1ml
IL-6 白介素6 規(guī)格: 0.1mlRNF150 環(huán)指蛋白150抗體 規(guī)格: 0.2ml
MUC13 粘蛋白13抗體 規(guī)格: 0.2mlPAGE4/GAGE9 前列相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Clenbuterol Hydrochloride(Spiropent) /瘦肉抗體 0.1mlFAR2 脂肪酰輔A還原2抗體 規(guī)格: 0.2ml
